产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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5492S | 1 个试剂盒(500 次检测;96 孔样式) |
产品包括 | 数量(计数) | 溶液颜色 | |||
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BrdU | 1 x 150 µl | ||||
Fixing/denaturing Solution | 2 x 25 ml | ||||
BrdU Mouse Detection mAb | 1 x 500 µl | 绿色 | |||
Anti-mouse IgG, HRP-Linked Antibody | 1 x 500 µl | 红色 | |||
Detection Antibody Diluent | 1 x 50 ml | 绿色 | |||
HRP Diluent | 1 x 50 ml | 红色 | |||
Luminol/Enhancer Solution | 1 x 25 ml | ||||
Stable Peroxide Buffer | 1 x 25 ml | ||||
20X Wash Buffer | 1 x 50 ml |
产品信息
发布于 2012 年 10 月
实验步骤编号:8
BrdU Cell Proliferation Assay Kit 使用 anti-BrdU antibody 可识别细胞增殖期间掺入到细胞 DNA 中的 5-溴-2'-脱氧尿嘧啶 (BrdU)。细胞用含有 BrdU 的标记培养基培养时,该嘧啶类似物会代替胸苷掺入增殖细胞的新合成 DNA 中。去除标记培养基后,对细胞进行固定,并用我们的固定/变性溶液使 DNA 变性。DNA 变性对提高掺入的 BrdU 进入检测抗体的比例非常重要。随后加入 BrdU mouse mAb 来识别掺入的 BrdU。使用 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 识别结合的检测抗体。添加化学发光试剂来增强信号。发光程度(按相对光单位 (RLU) 测量)与掺入细胞的 BrdU 的数量成比例,这可直接指示细胞增殖。
BrdU Cell Proliferation Chemiluminescent Assay Kit 可检测细胞增殖期间掺入到细胞 DNA 中的 BrdU。必须使 BrdU 标记的 DNA 变性,以便使用该试剂盒中的 BrdU mouse mAb 进行检测。该 BrdU mouse mAb 不会与内源性 DNA 发生交叉反应。根据检测中所使用的细胞类型和孵育时间,0.2-2x104 个细胞/孔对多数实验计划即可。为了获得最佳结果,建议进行细胞数目滴定(图 1)。
预期的所有物种
卤化核苷酸如嘧啶类似物溴脱氧尿苷 (BrdU) 对活细胞和组织中新生的DNA进行标记是有用的。BrdU 可代替胸苷掺入复制到 DNA 中,随后使用特异性单克隆抗体对 BrdU 进行免疫检测,以在细胞周期 S 期中对细胞进行标记。在利用溴脱氧尿苷对细胞或组织进行脉冲标记后,BrdU (Bu20a) Mouse mAb 可用于检测掺入单链 DNA 的 BrdU。请查看我们的详细流程以便了解与各种免疫检测应用的标记程序和双链 DNA 变性有关的信息 (1-4)。
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