Name: Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X)
Brand: Cell Signaling Technology
Availability: InStock

引用 (0)

Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X): Image 1 — 使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb #8480 对在没有蛋白酶抑制剂（左图）或添加 Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) #5872（右图）的裂解缓冲液中制备，且在 37ºC 下孵育特定时间点的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。在没有蛋白酶抑制剂的情况下，在采集后 3 小时内，β-Catenin 信号逐渐减弱，表明蛋白被降解。在有蛋白酶抑制剂混合物的情况下，β-Catenin 降解明显减弱，并且信号在采集后 20 小时仍然存在。

Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X): Image 2 — 使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060（上图）或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691（下图），对血清饥饿过夜、经 hPDGF-BB #8912（100ng/ml，5 分钟）处理、在没有磷酸酶抑制剂（左图）或添加 Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) #5872（右图）的裂解缓冲液中制备并在 37ºC 下孵育规定时间点的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。在没有磷酸酶抑制剂的情况下，在时间点 0 之后，磷酸化-Akt 信号明显减弱，表明磷酸化在之后的时间点快速消失。在有磷酸酶抑制剂混合物的情况下，磷酸化-Akt 信号在所有监测的时间点中依然被保留着。

图像库

了解有关我们如何获得图像的详情

相关产品

产品使用信息

1. 使用前，短暂涡旋 Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X)。

2. 在进行细胞裂解之前，在所需裂解缓冲液中按 1:100 的比例稀释混合物，以获得 1X 的使用浓度。

溶液和试剂

Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) 为一种特制的多成分混合抑制物，其中的抑肽酶、苯丁抑制素、E64 和亮抑酶肽可抑制多种内源性蛋白酶；而氟化钠、焦磷酸钠、β-甘油磷酸和原钒酸钠，则抑制多种内源性丝氨酸/苏氨酸以及酪氨酸磷酸酶。该混合物不含 EDTA（一种金属蛋白酶抑制剂），它与一些下游应用不相容（即蛋白芯片、2D 电泳等）。如要将 EDTA 用作蛋白酶抑制剂，则可添加到细胞裂解缓冲液中，其终浓度为 5mM。

保存

将未稀释的 100X 混合液储存在 4ºC 的温度下。切勿冷冻。本产品可稳定保存 12 个月。

产品说明

当裂解缓冲液中的稀释终浓度为 1X 时，Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail 可防止总细胞提取物中的内源性蛋白酶和磷酸酶对蛋白的降解和去磷酸化。100X 混合物为透明淡黄色到淡绿色的液体。

背景

动态蛋白磷酸化是许多细胞进程调控所依赖的一种关键细胞信号转导机制。为了研究特定靶蛋白的磷酸化状态，磷酸化的目标残基必须保持完整。当细胞裂解成总细胞提取物时，会发生正常细胞信号转导调节丢失，同时细胞提取物内的磷酸酶会以不受控的方式自由去磷酸化蛋白。磷酸酶抑制剂添加到细胞裂解缓冲液中有助于在发生细胞破碎时保留磷酸化残基。同样，在制备总细胞提取物时，对正常细胞控制的丧失会导致内源性蛋白酶不受控地降解蛋白。蛋白酶抑制剂添加到细胞裂解缓冲液中有助于保留细胞提取物中的靶蛋白。

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受，否书均被拒书，并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明，且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的，或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的，或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。

购买 # 5872S

产品货号	规格	价格	库存
5872S	1 ml

Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (100X) #5872

产品使用信息

溶液和试剂

保存

产品说明

背景

限制使用

仅供研究使用。不得用于诊断流程。