Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
45470S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人
通过使用与人 TRIM33 蛋白 Gln609 周围残基对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
转录中介因子 1 (TIF1) 家族由一组包含有多个组蛋白结合结构域的蛋白组成。在人体中,这个家族由 4 种蛋白组成:TIF1α/TRIM24、TIF1β/TRIM28/KAP1、TIF1γ/TRIM33/Ectodermin 和 TIF1δ/TRIM66,其结构特点表现为 1 个氨基末端三联基序 (TRIM),包括 1 个环状结构域、2 个 B 盒、1 个螺旋圈结构域和一个羧基末端 PHD 指以及溴结构域 (1)。尽管这些蛋白大体结构相似,但是它们在转录调控中有不同的作用。TIF1α 是一个配体依赖的核受体共调节子,近期发现能够调控 p53 稳定性 (2)。TIF1β 是 N-CoR1 共抑制复合体和 NuRD 核小体重构复合体的内在组分 (3) ,并且是Kruppel-associated box (KRAB) 锌指转录因子的共抑制因子 (4)。此外,TIF1β 可以作为异染色质蛋白 HP1的协同因子发挥异染色质介导的基因沉默功能 (5)。TIF1δ 仅表达于睾丸并已被证明可以与 HP1γ 相互作用 (6)。
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