Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
16211S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R Mk |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠, 猴
犬
使用与人 MEK1/2 的 Ser221 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
MEK1 和 MEK2 也称为 MAPK 或 Erk 激酶,是双重特异性蛋白激酶,在丝裂原活化蛋白激酶级联控制细胞生长和分化过程中起作用 (1-3)。MEK1 和 MEK2 通过 Raf 样分子对两个丝氨酸残基(217 和 221 位点)的磷酸化而激活,这两个丝氨酸位点位于亚结构域 VIII 的活化环内。多种生长因子和细胞因子,以及膜去极化和钙内流都能激活 MEK1/2 (1-4)。MEK1/2 的组成型活化形式足以转化 NIH/3T3 细胞和分化 PC-12 细胞 (4)。MEK 通过磷酸化位于激酶亚结构域 VIII 活化环内的苏氨酸和酪氨酸残基激活 p44 和 p42 MAP 激酶。
探索与本品相关的通路。
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