在 LC-MS/MS 之前,固定化金属亲和色谱 (IMAC) 是另一种用于使磷酸肽富集的策略。它使用带正电荷的离子(通常是 Fe3+)捕获带负电荷的磷酸肽。
比较 PTMScan® 抗体和 IMAC 磷酸肽富集:对人胃癌 (MKN-45) 细胞进行 PTM 分析。
使用各类基序/PTM 抗体(酪氨酸、脯氨酸、丝氨酸/苏氨酸和嗜碱性抗体)或 IMAC 方法对磷酸肽进行富集。
如所示,使用基序抗体组合来使 MKN-45 细胞中的磷酸肽富集 (A)。使用抗体和 IMAC 对 MKN-45 细胞中的磷酸肽进行富集所出现的重叠情况见面积比例文氏图。根据独特蛋白/位点进行比较 (B)。
查看完整数据集,这些数据集显示了抗体与 IMAC 富集法之间的互补性。
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