反应性 | H |
产品信息
CST 建议转染 100 nM SignalSilence® Aurora A/AIK siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。
每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。
通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。
Aurora 激酶属于高度保守的有丝分裂丝氨酸/苏氨酸激酶家族,已在哺乳动物细胞中识别出该家族的三个成员,分别为 Aurora A、B 和 C (1,2)。研究表明,时序表达模式和 Aurora 激酶在有丝分裂亚细胞定位与有丝分裂结构有关。Aurora 激酶的功能可作用于 G2 期到胞质分裂,有可能涉及重要的细胞周期事件,如中心体复制、染色体双向定位和隔离、卵裂沟的定位和脱离 (3)。Aurora A 在中心体上被发现,沿着有丝分裂的纺锤体微管以及在有丝分裂增殖细胞的细胞浆中分布。Aurora A 蛋白水平在 G1 期和 S 期很低,在细胞周期 G2/M 期达到最高。Aurora A 在催化域 Thr288 位点的磷酸化会增加激酶活性。Aurora A 可参与中心体分离、成熟和纺锤体装配和稳定性。Aurora B 蛋白也在细胞周期 G2/M 期表达最多;Aurora B 激酶活性在有丝分裂的中期到末期时最高。前期时 Aurora B 在染色体定位到纺锤体之前与之结合。Aurora B 通过控制微管-着丝粒的结合和胞质分裂调控染色体分离。G2/M期 Aurora A 和 Aurora B 的表达与组蛋白 H3 的磷酸化高度一致 (4,5);研究人员已经发现多种人类癌症中这些激酶均呈过表达 (2,4)。在前期到胞质分裂期,Aurora C 都位于中心体上, mRNA 和蛋白水平都在 G2/M 期达到最高。尽管典型的 Aurora C 蛋白的表达局限在睾丸中,但研究发现多种癌细胞系中也有过表达的 Aurora C (6)。
探索与本品相关的通路。
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