产品使用信息
CST 建议转染 100 nM SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。
每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。
保存
SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。
产品说明
Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence
® 4E-BP1 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 4E-BP1 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence
® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。
质量控制
通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。
背景
翻译抑制蛋白 4E-BP1(也称为 PHAS-1)可通过结合翻译起始因子 eIF4E 抑制帽子结构依赖性翻译。4E-BP1 的高度磷酸化会扰乱这种相互作用,进而导致帽子结构依赖性翻译被激活 (1)。PI3 激酶/Akt 通路和 FRAP/mTOR 激酶均可调节 4E-BP1 活性 (2,3)。多个 4E-BP1 残基
在体内被磷酸化 (4)。一般认为FRAP/mTOR 在 Thr37 和 Thr46 的磷酸化虽然不会阻碍 4E-BP1 与 eIF4E的结合,但会引导4E-BP1 后续在 Ser65 和 Thr70 的磷酸化 (5)。
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Pause, A. et al. (1994) Nature 371, 762-7.
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Brunn, G.J. et al. (1997) Science 277, 99-101.
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Gingras, A.C. et al. (1998) Genes Dev 12, 502-13.
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Fadden, P. et al. (1997) J Biol Chem 272, 10240-7.
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Gingras, A.C. et al. (1999) Genes Dev 13, 1422-37.
通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
限制使用
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