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6414
SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I
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SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I #6414

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SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I: Image 1
使用 4E-BP1 (53H11) Rabbit mAb #9644 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 ，对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。4E-BP1 (53H11) Rabbit mAb 确认 4E-BP1 表达沉默，而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样对照。
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支持数据

反应性 H

应用缩写：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Vir- Virus
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程，请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题，请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量，对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度（100 nM），每个孔的总量为 300 μl。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 4E-BP1 表达，这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试，并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成，以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA，从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比，以最大程度确保批间一致性。

背景

翻译抑制蛋白 4E-BP1（也称为 PHAS-1）可通过结合翻译起始因子 eIF4E 抑制帽子结构依赖性翻译。4E-BP1 的高度磷酸化会扰乱这种相互作用，进而导致帽子结构依赖性翻译被激活 (1)。PI3 激酶/Akt 通路和 FRAP/mTOR 激酶均可调节 4E-BP1 活性 (2,3)。多个 4E-BP1 残基在体内被磷酸化 (4)。一般认为FRAP/mTOR 在 Thr37 和 Thr46 的磷酸化虽然不会阻碍 4E-BP1 与 eIF4E的结合，但会引导4E-BP1 后续在 Ser65 和 Thr70 的磷酸化 (5)。
  1. Pause, A. et al. (1994) Nature 371, 762-7.
  2. Brunn, G.J. et al. (1997) Science 277, 99-101.
  3. Gingras, A.C. et al. (1998) Genes Dev 12, 502-13.
  4. Fadden, P. et al. (1997) J Biol Chem 272, 10240-7.
  5. Gingras, A.C. et al. (1999) Genes Dev 13, 1422-37.

通路和蛋白

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限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
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