反应性 | H M Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 45-50 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 小鼠, 猴
使用与人 ZFP36L1 蛋白的 Pro281 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
ZFP36L1 也称为丁酸反应因子-1 (BRF1),而 ZFP36L2 也称为丁酸反应因子-2 (BRF2),它们都属于 CCCH 锌指蛋白的 TIS11 家族 (1)。该蛋白质家族还包括三四脯氨酸 (TTP),与 mRNA 的 3'-非翻译区中发现的富含 AU 的元素 (ARE) 结合,并促进外泌体 的去腺苷酸化和快速降解 (2,3)。通过调控多种细胞因子、生长因子和细胞周期调节分子(包括 GM-CSF、TNFα、IL-2、IL-3 和 IL-6)的 mRNA 周转,这些蛋白质在细胞生长控制中发挥着重要的作用 (4,5)。去调控的 ARE-mRNA 稳定性会导致炎症和致癌性转化 (6-8)。胰岛素诱导的含 ARE 转录物的稳定化是由 ZFP36L1 在 Ser92 位点的 Akt/PKB 磷酸化介导的,这导致 14-3-3 蛋白的结合和 ZFP36L1 的失活 (9)。ZFP36L1 和 L2 也已显示可促进 B 淋巴细胞发育中的细胞静止,促进 VDJ 重组 (10)。
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