使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb(绿色),对小鼠小肠(左图)和骨骼肌(右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 alpha-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 在 Leica® Bond™ Rx 上对石蜡包埋的人子宫内膜样癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对已经 hTGF-β3 #8425 (7 ng/ml,1 小时)处理的 HaCaT 细胞中提取的交联染色质,在加入 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 ID1 内结合,ID1 是一种已知的 Smad2/3 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对已经 Human TGF-β 3 #8425 (7 ng/ml,1 小时)处理的 HaCaT 细胞中提取的交联染色质,在加入 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669、SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339(上图)和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 SMAD2 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。SMAD2 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 SMAD2 的特异性。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经 Human Growth Factor β1 #8915(7 ng/ml,1 小时)处理的 HaCaT 细胞的交联染色质与 Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139、Human JunB Promoter Primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 YKL-40 (E2L1M) Rabbit mAb(绿色)对 THP-1 细胞(左图,阳性)和 A-204 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。样品用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
在有或无 TGFR 抑制剂 SB 431542 的情况下,使用 Phospho-Smad2 (Ser465/467)/Smad3 (Ser423/425) (D27F4) Rabbit mAb(上图)或 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb #8685(下图),对未经处理 (-) 或经 hTGF-β3 #8425 (+) 处理的 HaCaT 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb 对重组活性 TGF-β1 进行蛋白质印迹分析。
使用 TGF-β Receptor II Antibody(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经 (-) 或已经 PNGase F 处理 (+) 的 Hep G2 细胞和未处理的 A172 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
对 U-118 MG 细胞提取物 COL1A1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入对照,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb。使用 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对已经 hTGF-β3 #8425 (7 ng/ml,1 小时)处理的 HaCaT 细胞中提取的交联染色质,在加入 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 20(上图)内的结合,包括 Smad2/3 的已知靶基因 ID1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb(实线)对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
使用 Phospho-Smad2 (Ser465/467) (E8F3R) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未处理的(蓝色)、经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3) #8425(100 ng/mL,30 分钟;绿色)处理,或经 SB43152(10 ug/mL,30 分钟)预处理后再用 hTGF-β3(100 ng/mL,30 分钟;红色)处理的血清饥饿 HT-1080 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体 对石蜡包埋的人肺鳞状细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb 对转染空载或转染 TGF-β1 前体的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 TGF-β Receptor II Antibody(上图)、Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278(中间)和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对转染空载 (-) 或转染编码带 myc/DDK 标签的人 TGF-β 受体 II (+) 的质粒表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人阑尾细胞进行免疫组织化学分析。
使用 COL1A1 (E8I9Z) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对已经 hTGF-β3 #8425 (7 ng/ml,1 小时)处理的 HaCaT 细胞中提取的交联染色质,在 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669、SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb(绿色)对血清饥饿(左图)或已经 hTGF-β3 #8425 处理(右图)的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
使用 Phospho-Smad2 (Ser465/467) (E8F3R) Rabbit mAb(绿色)对未处理的(左图)、经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3) #8425(100 ng/mL,20 分钟;中间)处理,或经 hTGF-β3 处理后用 λ 磷酸酶处理(右图)的血清饥饿 HT-1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
使用 TGF-β (56E4) Rabbit mAb,对 K-562、Saos-2 与 786-0 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管细胞进行免疫组织化学分析。
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor®488Conjugate) #4412用作二抗。
对经 Human Transforming Growth Factor β1 (hTGF-β1) #8915(10 nM,30 分钟)处理的 HaCaT 细胞的提取物磷酸化 SMAD2 (Ser465/Ser467) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb。使用 P-SMAD2 (Ser465/ Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用于检测,以避免与 IgG 具有的交叉反应性。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢浆液性乳头状癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb(绿色)对血清饥饿(左图)、已经 hTGF-β3 #8425 处理(100 ng/ml,30 分钟,中间)或已经 hTGF-β3 和 SB43152 (10 ug/mL,1 小时,右图)处理的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。
使用 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Phospho SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb(上图)和总 Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb #5339(下图)对未经 (-) 或经 Human Transforming Growth Factor β3 (hTGF-β3)#8425(100 ng/ml,30 分钟)(+) 处理的 HaCaT 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 THP-1 细胞沉淀物(左图,阳性)或 A-204 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
对 HCT116 细胞提取物 Smad2/3 蛋白进行免疫沉淀法分析。泳道 1 为10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道3 为 Smad2/3 (D7G7) XP®。使用 Smad2/3 (D7G7) XP® 进行蛋白质印迹法分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 用作二抗。
使用 YKL-40 (E2L1M) 兔单克隆抗体(上图)和上样对照 α-辅肌动蛋白 (D6F6) XP® 兔单克隆抗体 #6487 对 THP-1 和 A-204 的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预计的一样,A-204 细胞中的 YKL-40 表达较低且呈阴性。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb 对 HeLa 和 ACHN 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠骨骼肌细胞进行免疫组织化学分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠细胞进行免疫组织化学分析。
对小鼠结肠组织提取物 α-平滑肌肌动蛋白进行行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb。使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb(上图)和 GAPDH #5174(下图),对不同人、小鼠和大鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预期,骨骼肌样品的 α-平滑肌肌动蛋白表达呈阴性。