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56511
Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit #56511

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Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 1

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb(绿色)对小鼠延髓进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色 = DAPI #4083(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 2

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对正常小鼠大脑和 Tau KO (-/-) 小鼠大脑进行蛋白质印迹分析。Tau-KO 小鼠脑组织由布莱根妇女医院和哈佛医学院的 Dominic Walsh 博士惠赠。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 3

使用 Tau (Tau46) Mouse mAb 对石蜡包埋的阿尔茨海默病患者脑细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 4

使用 Tau (Tau46) Mouse mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对正常小鼠大脑和 Tau KO (-/-) 小鼠大脑进行蛋白质印迹分析。Tau-KO 小鼠脑组织由布莱根妇女医院和哈佛医学院的 Dominic Walsh 博士惠赠。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 5

使用 NeuN (D4G4O) XP® Rabbit mAb(绿色)对小鼠海马(左)、皮质(中)和小脑(右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 6

使用 Synaptophysin (7H12) Mouse mAb (IF Formulated) (绿色) 与 CNPase (D83E10) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #5715 (左,红色),对小鼠脑(左图)与小鼠视网膜(右图)组织进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 7

使用 PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb(红色)和 Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835(绿色),对大鼠小脑和视网膜细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 8

使用与非特异性阴性对照抗体(红色)相对比的 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody 对未经(蓝色)或经依托泊苷 #2200(绿色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 9

使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线),对未经(蓝色)或已经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时;绿色)处理的血清饥饿 Neuro-2a 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 10

对过表达突变型人 APP695 的小鼠 Tg2576 脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。切片用 GFAP (E6N9L) Mouse mAb(绿色,小鼠 IgG2a)、β-Amyloid (D3D2N) Mouse mAb #15126(红色,小鼠 IgG1)和 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) #3892(品红色,兔 IgG)标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 11

使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 对 NIH/3T3 细胞(红色)和 32D 细胞(蓝色)进行流式细胞分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 12

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb(绿色)对野生型小鼠脑中的齿状回细胞进行共聚焦免疫荧光分析。抗体用非磷酸化 Tau 肽(左图)、磷酸化 Tau (Thr205) 肽(中间)预孵育,或不用肽(右图)预孵育,以确认磷酸化特异性。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 13

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb(上图)和 Tau (D1M9X) Rabbit mAb #46687(下图),对未经 (-) 或已经磷酸酶 (+) 处理的小鼠脑细胞提取物,以及大鼠脑细胞进行蛋白印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 14

使用 Tau (Tau46) Mouse mAb 对小鼠和大鼠脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 15

使用 NeuN (D4G4O) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小脑细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 16

使用 PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb 对人小脑和大鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 17

对未经处理(左图)或经 staurosporine #9953 处理(右图)且用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody(绿色)标记的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光图像分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin #8953(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5®(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 18

使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线),对未经(蓝色)或已经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时;绿色)处理的血清饥饿 H-4-II-E 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 19

对小鼠脑组织提取物的 GFAP 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Mouse (E5Y6Q) mAb IgG2a Isotype Control #61656,泳道 3 为 GFAP (E6N9L) Mouse mAb。使用 GFAP (E6N9L) Mouse mAb 进行蛋白印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 20

对过表达突变型人 APP695 的小鼠 Tg2576 脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。首先用 HS1 (D5A9) XP® 兔单克隆抗体 (特定啮齿类动物)(绿色)和 APP/β-Amyloid (NAB228) 小鼠单克隆抗体 #2450(黄色)标记切片。用小鼠 (G3A1) 单克隆抗体 IgG1 同型对照 #5415 封闭游离二抗结合位点之后,切片用 GFAP (GA5)小鼠单克隆抗体(Alexa Fluor® 647 偶联物)#3657(红色)孵育。胞核用 Hoechst 33342 #4082(蓝色)标记。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 21

在添加非磷酸化 Tau (Thr205) 肽(左图)或磷酸化 Tau (Thr205) 肽(右图)的情况下,使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人阿尔茨海默病脑细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 22

使用 NeuN (D4G4O) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠(肠肌丛)细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 23

使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(绿色),对未经(左图,阴性)或经 Staurosporine #9953(1 μM, 3小时,右图,阳性)处理的 Neuro-2a 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 24

使用 GFAP (E6N9L) Mouse mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同组织和细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 25

使用 HS1 (D5A9) XP® 兔单克隆抗体(特定啮齿类动物)(绿色)对 32D 细胞(左图)和 C2C12 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 26

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 27

使用 NeuN (D4G4O) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人多形性恶性胶质瘤细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 28

使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody 对石蜡包埋的人扁桃体细胞进行免疫组织化学分析,显示其位于凋亡细胞(低倍和高倍放大)中细胞浆和核周。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 29

使用 Cleaved PARP (Asp214)(D6X6X) mAb (Rodent Specific) 对未经(左图,阴性)或已经 Staurosporine #9953(右图,阳性)处理的石蜡包埋的 3T3 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 30

使用 GFAP (E6N9L) Mouse mAb 作为一抗对小鼠脑细胞的提取物进行蛋白印迹分析。各种抗小鼠同型特异性抗体(上图)和 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076(下图)用作二抗。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 31

使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠脾进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 32

使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 33

使用 NeuN (D4G4O) XP® Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对小鼠脑细胞、C2C12 细胞和大鼠脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 34

使用 Cleaved caspase-3 (Asp175) antibody 和 SignalSlide™ Cleaved Caspase-3 IHC controls #8104对未经(左)或经依托泊苷处理(右)的石蜡包埋的 Jurkat 细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 35

使用 Cleaved PARP (Asp214)(D6X6X) mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的 E14 大鼠胚胎细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 36

使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的 LL2 同基因的肿瘤进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 37

对小鼠脑裂解物磷酸化-Tau (Thr205) 进行免疫沉淀。泳道 1 为小鼠脑细胞裂解物免疫沉淀;泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900;泳道3、4 和 5 表示小鼠脑细胞裂解物的三种免疫沉淀稀释度分别为 1:50、1:100 和 1:200;泳道 6 为小鼠脑细胞裂解物。使用 Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 38

使用经对照肽(左)或 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Blocking Peptide #1050(右)预孵育的 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody 对石蜡包埋的小鼠胚胎细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 39

使用 Cleaved PARP (Asp214)(D6X6X) mAb (Rodent Specific) 对未经(左图,阴性)或已经 Staurosporine #9953(右图,阳性)处理的石蜡包埋的 H-4-II-E 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 40

使用 HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 对来自 Baf3、32D 和小鼠脾的细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 41

使用 Caspase-3 Antibody #9662(上)或 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody(下)对未经、经十字孢碱处理(3 小时,1 µM,体内)或经细胞色素 c 处理(1 小时,0.25 mg/ml,体外)的 HeLa、NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 42

使用 Cleaved PARP (Asp214)(D6X6X) mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠卵巢细胞进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 43

使用 Cleaved PARP (Asp214)(D6X6X) mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠脾进行免疫组织化学分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 44

对经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时)处理的 Neuro-2a 细胞提取物的裂解活化 PARP (Asp214) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)。使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 45

使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经 (-) 或已经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时)处理的血清饥饿 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit: 图像 46

使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经 (-) 或已经 Staurosporine #9953(1 μM,6 小时;+)处理的血清饥饿 H-4-II-E 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

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产品说明

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit 提供一种经济合算的方法,通过免疫荧光法来检测小鼠模型中的蛋白以确认神经元活性以及周围的星形胶质细胞和小胶质细胞。

特异性/敏感性

Tau Mouse Model Neuronal Viability IF Sampler Kit 中的每种抗体都能检测其靶蛋白的内源水平。Tau (Tau46) Mouse mAb 可检测 tau 总蛋白的内源水平,还会与 280 kDa 的 MAP2 发生交叉反应。根据氨基酸序列推测,Tau (Tau46) Mouse mAb 预计可识别所有 6 种 Tau 同工型。Phospho-Tau (Thr205) (E7D3E) Rabbit mAb 可检测仅在 Thr205 被磷酸化的 tau 蛋白的内源水平。Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 可识别仅在 Asp214 位点被裂解活化的内源水平的啮齿动物 PARP 蛋白大片段 (89 kDa)。HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 无法检测人 HS1 蛋白。经计算,HS1 大小为 54 kDa,但是在 SDS-PAGE 凝胶上的表观分子量为 80 kDa。Cleaved Caspase-3 (Asp175) Antibody 可检测 Asp175 附近剪切产生的激活半胱天冬酶-3 的大片段 (17/19 kDa) 的内源水平。该抗体不可检测全长的 caspase-3 或其他剪切的半胱天冬酶。该抗体可在蛋白印迹实验中检测非特异性半胱天冬酶底物。通过对固定冷冻组织中特定健康细胞亚型(如胰腺 α 细胞)进行免疫荧光分析可观察到非特异性标记。在大鼠和猴样本中可能会观察到胞核背景。

来源/纯化

使用与人 PSD95 中 Gln53、啮齿动物 PARP1 中 Asp214、小鼠 HS1 中 Leu310 周围的残基、人 caspase-3 中 Asp175 周围的氨基末端残基相对应的合成肽、人 tau 中 Thr205 周围的磷酸肽、对人 SYP 的羧基末端和人 NeuN 的氨基末端具有特异性的重组蛋白、从猪脊髓中纯化而来的天然 GFAP,以及天然牛 tau 和与该蛋白羧基末端相对应的表位图对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体和多克隆抗体。

背景

Tau 是一种异源微管相关蛋白,可促进并稳定微管组装,尤其是在轴突中。神经纤维缠结是阿尔茨海默病的一个主要病理性标志;这些缠结是由高度磷酸化的 tau(包括在 Thr205 被磷酸化的 tau)构成的成对螺旋纤丝束 (1,2)。研究表明,在许多其他神经退行性疾病细胞中会发现 tau 内含物,统称 tau 病变 (1,3)。神经元细胞核 (NeuN, Fox-3, RBFOX3) 是一种在多数中枢和周围神经系统的有丝分裂后神经元中表达的胞核蛋白。未在浦肯野细胞、交感神经节细胞、Cajal-Retzius 细胞、INL 视网膜细胞、下橄榄核或齿核神经元中检测到 NeuN (4)。胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 是成熟脑星形胶质细胞和放射状神经胶质细胞的主要中间纤丝。GFAP 在调节星形胶质细胞运动和形状方面起着重要作用 (5)。HS1 是仅在造血源的组织和细胞中表达的蛋白激酶底物 (6)。以往使用 RNA-seq 发现特定脑细胞类型的标记物的研究表明,HS1 有用且是研究小胶质细胞的专门工具 (7)。突触素(SYP)是一种神经元突触囊泡糖蛋白,存在于神经元的突触前囊泡中(8)。突触后致密蛋白 95 (PSD95) 是膜相关鸟苷酸激酶 (MAGUK) 蛋白家族的一员。PSD95 是一种与突触后致密复合体的组装和功能相关的支架蛋白 (9,10)。Caspase-3 (CPP-32、Apoptain、Yama、SCA-1) 是凋亡的关键执行者,因为它对许多关键蛋白起着部分或全部溶蛋白性剪切作用,如核酶多聚(ADP-核糖)聚合酶 (PARP) (11)。PARP 是一种 116 kDa 的核多聚(ADP-核糖)聚合酶,参与环境应激引起的 DNA 修复 (12)。PARP 协助细胞维持生存能力;PARP 剪切促进细胞崩解并可以作为细胞凋亡的标志 (13)。

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  13. Oliver, F.J. et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 33533-33539.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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