使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已发现 EZH2 和 H3K27me3 在染色质中相互结合。该图显示了 EZH2 和 H3K27me3 在 MYT1 基因中的结合。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 Ezh2 的已知靶标基因 HoxA1 处结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
对来自 NCCIT 细胞提取物的 EZH1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb。使用 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞的交联染色质与 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 RING1B (D22F2) XP® Rabbit mAb进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已知 SUZ12 和 RING1B 在染色质上互相结合。结果图显示HOXD 基因上的SUZ12 和 RING1B结合,HOXD 基因是 SUZ12 和 RING1B 的已知靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其它结果图)。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 SUZ12 的已知靶基因 HoxA1 处结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 EED 抗体(上图)和 GAPDH (D16H11) XP® 兔单克隆抗体 #5174(下图)对转染非靶向 siRNA (293T siNT) 或 siRNA 靶向 EED (293T siEED) 的 293T 细胞及 F9 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞交联染色质和 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb #14129 进行染色质免疫沉淀法。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXD 基因簇范围内 JARID2, CBX8 和 AEBP2(其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因)的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。结果图显示 JARID2、CBX8 和 AEBP2(JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶基因)在 HOXA 基因区域内的结合(参见含 ChIP-qPCR 数据的附加结果图)。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已发现 EZH2 和 H3K27me3 在染色质中相互结合。结果图显示在染色体 20(上图)内 EZH2 和 H3K27me3 两者的结合,包括 MYT1 基因(下图)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 7(上图)内的结合,包括 HoxA 基因(下图),HoxA 基因是 EZH2 靶标基因的已知基因簇(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞的交联染色质与 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 RING1B (D22F2) XP® Rabbit mAb进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已知 SUZ12 和 RING1B 在染色质上互相结合。结果图显示 HOXA 基因上的 SUZ12 和 RING1B (上图)与 SUZ12 的已知靶标基因 HOXD 基因的结果(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其它结果图)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 SUZ12 的已知靶基因 HoxD(上图)和 HoxA(下图)处结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞交联染色质和 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb #14129 进行染色质免疫沉淀法。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXA(上图)和 HOXD(下图)范围内 JARID2、CBX8 和 AEBP2(其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因)的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXA(上图)和 HOXD(下图)范围内 JARID2、CBX8 和 AEBP2(其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因)的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞的交联染色质与 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量使用与染色质输入总量(相当于1)相对应的信号表示。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对NCCIT 细胞的交联染色质与 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb(上)和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下),对细胞提取物进行蛋白质印迹法分析,这些提取物为未处理(-)或使用视黄酸以诱导分化(1 μM, 5 d; +)处理的 F9 细胞和 NTERA-2 细胞。正如预期,JARID2 蛋白水平在 NTERA-2 细胞分化时下降。
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道2)或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb(泳道3),对 NCCIT 细胞提取物 AEBP2 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb,进行蛋白质印迹法分析。
使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb (上)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487 (下),对细胞提取物进行蛋白质印迹法分析,这些细胞是使用 100 nM SignalSilence® Control siRNA(无偶联)#6568 (-)、SignalSilence® AEBP2 siRNA I #14711 (+) 或 SignalSilence® AEBP2 siRNA II #14713 (+) 转染的 HeLa 细胞。AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 证实了 AEBP2 表达的沉默,而 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb 则被用于上样对照。
使用 EZH2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对未经处理(左图)和经抗人 CD3(10ug/ml,涂层平板)和抗人 CD28 (5ug/ml) 在 37ºC 下处理(右图)3天的人外周血单核细胞进行流式细胞分析,并与抗人 CD3 抗体联合染色。使用 Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb(绿色)对小鼠海马(左图)和小脑(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞(左图)和 NTERA2 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb(绿色)和S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb #2317(蓝色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。
使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb(绿色)对在小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 饲养细胞中生长的小鼠胚胎干细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人宫颈癌进行免疫组织化学分析。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 4T1 小鼠同基因肿瘤进行免疫组织化学分析。
使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对 MCF7、Neuro-2a 和 COS-7 细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。