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62083
Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit #62083

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Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 HeLa 细胞中提取的交联染色质，在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已发现 EZH2 和 H3K27me3 在染色质中相互结合。该图显示了 EZH2 和 H3K27me3 在 MYT1 基因中的结合。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过 NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 Ezh2 的已知靶标基因 HoxA1 处结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 3

对来自 NCCIT 细胞提取物的 EZH1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb。使用 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞的交联染色质与 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 RING1B (D22F2) XP® Rabbit mAb进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。已知 SUZ12 和 RING1B 在染色质上互相结合。结果图显示HOXD 基因上的SUZ12 和 RING1B结合，HOXD 基因是 SUZ12 和 RING1B 的已知靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其它结果图）。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过 NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 SUZ12 的已知靶基因 HoxA1 处结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 EED 抗体（上图）和 GAPDH (D16H11) XP® 兔单克隆抗体 #5174（下图）对转染非靶向 siRNA (293T siNT) 或 siRNA 靶向 EED (293T siEED) 的 293T 细胞及 F9 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞交联染色质和 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb #14129 进行染色质免疫沉淀法。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXD 基因簇范围内 JARID2, CBX8 和 AEBP2（其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因）的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质，在加入 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。结果图显示 JARID2、CBX8 和 AEBP2（JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶基因）在 HOXA 基因区域内的结合（参见含 ChIP-qPCR 数据的附加结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质，在加入 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 11

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过 NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 7（上图）内的结合，包括 HoxA 基因（下图），HoxA 基因是 EZH2 靶标基因的已知基因簇（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 EZH1 (D7D5D) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCCIT 细胞的交联染色质与 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量使用与染色质输入总量（相当于1）相对应的信号表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过 NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 SUZ12 的已知靶基因 HoxD（上图）和 HoxA（下图）处结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 15

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞交联染色质和 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb #14129 进行染色质免疫沉淀法。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXA（上图）和 HOXD（下图）范围内 JARID2、CBX8 和 AEBP2（其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因）的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 16

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质，在加入 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594、CBX8 (D2O8C) Rabbit mAb #14696 或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。所有 JARID2、CBX8 和 AEBP2 已知可结合 PRC 复合体。本图显示整个 HOXA（上图）和 HOXD（下图）范围内 JARID2、CBX8 和 AEBP2（其为 JARID2、CBX8 和 AEBP2 的已知靶标基因）的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 17

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，NCCIT 细胞和 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 18

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过€‚ NCCIT 细胞和 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 19

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对NCCIT 细胞的交联染色质与 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 20

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质，在加入 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量，用染色质投入总量（相当于 1）相对应的信号进行表示。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 21

使用 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb（上）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下），对细胞提取物进行蛋白质印迹法分析，这些提取物为未处理（-）或使用视黄酸以诱导分化（1 μM, 5 d; +）处理的 F9 细胞和 NTERA-2 细胞。正如预期，JARID2 蛋白水平在 NTERA-2 细胞分化时下降。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 22

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道2）或 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb（泳道3），对 NCCIT 细胞提取物 AEBP2 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb，进行蛋白质印迹法分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 23

使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 24

使用 EZH2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对未经处理（左图）和经抗人 CD3（10ug/ml，涂层平板）和抗人 CD28 (5ug/ml) 在 37ºC 下处理（右图）3天的人外周血单核细胞进行流式细胞分析，并与抗人 CD3 抗体联合染色。使用 Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 25

以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb（实线）对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 26

使用 AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb （上）或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487 （下），对细胞提取物进行蛋白质印迹法分析，这些细胞是使用 100 nM SignalSilence® Control siRNA（无偶联）#6568 (-)、SignalSilence® AEBP2 siRNA I #14711 (+) 或 SignalSilence® AEBP2 siRNA II #14713 (+) 转染的 HeLa 细胞。AEBP2 (D7C6X) Rabbit mAb 证实了 AEBP2 表达的沉默，而 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb 则被用于上样对照。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 27

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb（绿色）对小鼠海马（左图）和小脑（右图）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #（红色）进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 28

使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb（绿色）对 HeLa 细胞（左图）和 NTERA2 细胞（右图）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 29

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb（绿色）和S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb #2317（蓝色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 30

使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb（绿色）对在小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 饲养细胞中生长的小鼠胚胎干细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 31

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 32

使用 SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 33

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人宫颈癌进行免疫组织化学分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 34

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 35

使用 Ezh2 (D2C9) XP® 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 4T1 小鼠同基因肿瘤进行免疫组织化学分析。

Polycomb Group 2 (PRC2) Antibody Sampler Kit: 图像 36

使用 Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb 对 MCF7、Neuro-2a 和 COS-7 细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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62083T		 1 个试剂盒(6 x 20 µl)

定制制剂

产品说明

Polycomb Group 2 (PRC2) 抗体小包装组合提供一种经济合算的方式来评估 Polycomb Group 2 Proteins 的总水平。试剂盒包括足量的一抗和二抗，可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

Polycomb Group 2 (PRC2) 抗体小包装组合中的每种抗体都可检测内源水平的靶标蛋白。

来源/纯化

使用与人 Ezh2 中 Arg354、人 SUZ12 蛋白中 Pro257、人 EED 中 Leu23、人 JARID2 中 Asp1114、人 AEBP2 中 Leu345 以及 EZH1 中羧基末端周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

多梳家族 (PcG) 蛋白参与维持数个发育调节基因的沉默状态，并且有助于维持细胞身份、细胞周期调节和肿瘤发生(1-4)。zest 同源物 1 的增强子 (Ezh1) 和 zest 同源物增强子 2 (Ezh2) 是这个大蛋白家族的一员，也是多梳阻遏蛋白复合体 2 (PRC2) 的一个亚基，已知该复合体还包含SUZ12、EED、JARID2 和 AEBP2。Ezh1 及其横向同源物 Ezh2 是 PRC2 复合体的两个互不相交的催化亚基，PRC2 复合体可甲基化、二甲基化和三甲基化组蛋白 H3 上的 Lys27，是与转录抑制有关的所有标记。SUZ12 和 EED 蛋白对于甲基转移酶活性也是绝对必须的 (5)。JARID2 和 AEBP2 都是辅助蛋白，它们能够通过结合核小体中的 DNA 和组蛋白结合来募集 PRC2 复合体至靶标基因，并增强甲基转移酶活性 (6-14)。

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  14. Kalb, R. et al. (2014) Nat Struct Mol Biol 21, 569-71.

通路和蛋白

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