产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
---|---|---|---|
14716S | 100 µl |
为庆祝中国农历新年,我们的中国办事处将于2021年2月11日至2021年2月20日关闭。
感谢您的耐心等待。
反应性 | H M |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 78, 74 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫沉淀 | 1:50 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:263
本实验步骤适用于使用 Protein A agarose beads 对天然蛋白进行免疫沉淀,以进行蛋白质免疫印迹或激酶活性分析。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
10X 细胞裂解缓冲液:(#9803) 要制备 10 ml 的 1X 细胞裂解缓冲液,将 1 ml 细胞裂解缓冲液添加至 9 ml dH2O,并混合。
注意:使用前,请立即添加 1 mM PMSF (#8553)。
继续下述其中一项的具体步骤。
注意:为了最大限度减少变性 IgG 重链产生的遮盖作用 (~50 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb (#3677) 或 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)。为了最大限度减少变性 IgG 轻链产生的遮盖作用 (~25 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)
发布于 2008 年 12 月
修订于 2018 年 4 月
实验步骤编号:409
仅在 Sin1 蛋白在 Thr86 位点被磷酸化时,Phospho-Sin1 (Thr86) (D4U9L) Rabbit mAb 才能识别出内源水平的 Sin1 蛋白。
人, 小鼠
大鼠
使用与人 Sin1 蛋白中磷酸化 Thr86 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
细胞生长是基本的生物进程,在此过程中细胞大量聚合和扩大。哺乳动物 TOR (mTOR) 通路能协调能量和营养素信号和生长因子源性信号来调节细胞生长 (1)。mTOR 是一种大蛋白激酶,也是以下两种不同复合体的组分。作为 rapamycin 的靶标,mTOR 复合体 1 (mTORC1) 包含 mTOR、GβL 和 raptor。mTORC2 对 rapamycin 不敏感,包括 mTOR、GβL、Sin1 和 rictor (1)。mTORC2 复合体在体外磷酸化 Akt/PKB的 Ser473位点 (2)。这种磷酸化是 Akt/PKB 完全激活所必需的。此外,使用 siRNA 敲除 rictor 会抑制 3T3-L1 脂肪细胞的 Ser473 磷酸化 (3)。mTORC2 经证实还能磷酸化 S6K1(mTOR 的另一个效应子)的 rapamycin 抗性突变体 (4)。另外,Akt/PKB 磷酸化 Sin1的 Thr86位点 经证实能在受到生长因子刺激时调节脂肪细胞的 mTORC2 活性 (5)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。
专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专