反应性 | 所有物种 |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Phospho-(Ser/Thr) ATM/ATR Substrate (4F7) Rabbit mAb 可检测内源水平的包含 ATM/ATR 底物基序的蛋白。该抗体优先结合包含磷酸- Ser/Thr(在 -1 位点之前是 Leu 或类似疏水性氨基酸,在 + 1 位点后是 Gln)的肽和蛋白。该抗体不会与相应非磷酸化序列或包含磷酸-Ser/Tyr 的其他基序发生交叉反应。(美国专利号:6,441,140;6,982,318;7,259,022;7,344,714;美国系列号 11,484,485;和全部外国同类产品)
预期的所有物种
使用磷酸-ATM/ATR 底物合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
共济失调毛细血管扩张症突变蛋白激酶 (ATM) 和共济失调毛细血管扩张症以及 Rad3 相关激酶 (ATR) 是与调节细胞周期检查点和 DNA 修复相关的激酶 (1)。经鉴别的 ATM 的底物为 p53、p95/NBS1、MDM2、Chk2、BRCA1、CtIP、4E-BP1、及 Chk1 (1,2) 。ATM/ATR 底物的基本要求为 S*/T*Q。在 -3和 -1 位置具有疏水性氨基酸以及 +1 位置具有带负电的氨基酸对这些激酶的底物识别起到正向决定作用。S*/T*Q 附近的正电荷残基对底物磷酸化有负向决定作用 (3)。AT 细胞的复杂表型表明它们很有可能还有其它底物 (3)。为更好理解激酶并识别 ATM 底物以及 ATR 相关激酶,CST 开发了可识别 S*/T*Q 基序中磷酸化丝氨酸或苏氨酸的抗体。
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