产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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5661T | 20 µl | ||
5661S | 100 µl |
为庆祝中国农历新年,我们的中国办事处将于2021年2月11日至2021年2月20日关闭。
感谢您的耐心等待。
反应性 | H M R Mk |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 42 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Phospho-PKA C (Thr197) (D45D3) Rabbit mAb 仅在 PKA C(-α、-β 和 -γ)在 Thr197 位点被磷酸化时方可检测内源水平的 PKA C(-α、-β 和 -γ)。
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用与人 PKA C 蛋白中 Thr197 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
在哺乳动物细胞中,第二信使环腺苷酸 (cAMP) 激活 cAMP 依赖的蛋白激酶(PKA 或 CAPK),并调控基因转录、离子转运和蛋白磷酸化等多个细胞机制 (1)。失活的 PKA 是由一个调节亚基 (R) 二聚体和一个催化亚基 (C) 二聚体组成的异四聚体。当处于失活状态时,R 亚基的假底物序列会阻断 C 亚基上的活性位点。现已发现三个 C 亚基同工型(C-α、C-β 和 C-γ)和两个调节亚基(RI 和 RII)家族,并且都具有不同的 cAMP 结合特性。两个 R 家族有两种同工型:α 和 β(RI-α、RI-β、RII-α 和 RII-β)。cAMP 结合 R 亚基时,可缓解自抑制接触并释放活化的单体 C 亚基。PKA 与 Akt (PKB) 和 PKC 共有底物特异性,其特点在于与磷酸化的丝氨酸或苏氨酸残基相对的位置 -3 有一个精氨酸 (2)。具有这种共有序列并且经证实被 PKA 磷酸化的底物包括:Bad (Ser155)、CREB (Ser133) 和 GSK-3(GSK-3α Ser21 和 GSK-3β Ser9)(3-5)。此外,同时敲除 PKA C-α 和 -β 会阻断 cAMP 介导的 Raf(Ser43 和 Ser259)磷酸化 (6)。PDK-1 自磷酸化和磷酸化是已知负责 C 亚基 Thr197 磷酸化的两种机制 (7)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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