产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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3129S | 100 µl | ||
3129L | 300 µl |
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感谢您的耐心等待。
反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 145 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Phospho-Met (Tyr1234/1235) (3D7) Rabbit mAb 仅在酪氨酸1234/1235磷酸化后可检测内源水平的 Met。该抗体可与被激活的 Ron 和 FGF 受体发生交叉反应。
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 Met 的 Tyr1234/1235 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Met 是肝细胞生长因子(HGF,也称散射因子)的一种高亲和性酪氨酸激酶受体,也是一种由 45 kDa α 和 145 kDa β 亚基构成的二硫键连接异二聚体 (1,2)。α-亚基和 β-亚基的氨基末端区域构成胞外域。β-链的剩余部分横跨质膜,包含一个具有酪氨酸激酶活性的胞质区。Met 与 HGF 相互作用会导致多个酪氨酸自磷酸化,继而募集多种下游信号转导组分,包括 Gab1、c-Cbl 和 PI3 激酶 (3)。这一系列基础活动对于所有与 Met 激酶活性相关的生物功能十分重要。加入细胞质 Tyr1003 位点的磷酸盐对于 Met 蛋白质泛素化和降解十分必要 (4)。Met 激酶结构域中在 Tyr1234/1235 位点的磷酸化对于激酶激活十分关键。Met 胞质域中在 Tyr1349 位点的磷酸化为 Gab1 提供一个直接结合位点 (5)。研究表明,在肾癌、结肠癌和乳腺癌等多种癌症中发现 Met 水平和/或酪氨酸激酶活性发生变化。因此,研究人员得出结论,Met 是一个具有吸引力的潜在癌症诊治靶标 (6,7)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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