反应性 | H M R |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 50 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 CDC37 蛋白的 Ser13 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CDC37 是 HSP90 分子伴侣复合体的一个重要组分 (1,2)。最初确定 CDC37 与细胞周期进程有关,但后来发现 CDC37 作为分子伴侣对各种激酶和其他蛋白有更广泛的作用 (1-3)。CDC37 蛋白有一个氨基末端激酶结合域和一个 HSP90 中央结合域。CDC37 能够保护新合成激酶肽链不被降解,并促进进入蛋白成熟的下一阶段,从而在 HSP90 复合体中募集激酶并使之稳定 (4,5)。CDC37 还能抑制 HSP90 的 ATP 酶活性,导致复合体发生构象变化,进而排除靶标激酶的上样 (6)。CDC37 可作为一种治疗靶标,因为 CDC37 能在细胞增殖和癌细胞存活有关的多种激酶通路中发挥重要作用,如 Raf 通路、Akt 通路、Src 通路、ErbB2 通路 (7,8)。
CDC37 在其羧基末端 Ser13 残基处被 CKII 磷酸化;这种磷酸化为其与 HSP90 的相互作用及靶标蛋白稳定功能 (9,10) 所必需。
探索与本品相关的通路。
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