反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
免疫荧光法(免疫细胞化学) | 1:50 |
流式细胞术(固定/通透) | 1:400 |
若想获得高质量的免疫荧光图片,请使用我们 #12727 Immunofluorescence Application Solutions Kit 中高效且划算的预制试剂。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
建议使用偶联荧光素的抗兔二抗:
注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。
吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。
注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布时间 2006 年 11 月
修订时间 2013 年 11 月
实验步骤编号:24
本实验步骤中所需的所有试剂可与我们的 Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593 一起高效购买,或使用下文所列的货号单独购买。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:固定前,贴壁细胞或组织应予以解离并处于单细胞悬液中。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
注:如果使用全血,则在固定前裂解红细胞并通过离心来洗涤。
注:如果表位被甲醛和/或甲醇破坏,可以在固定前添加靶向 CD 标记物或其他胞外蛋白质的抗体。在固定和透化过程期间,这类抗体将保持与目的靶标结合。但注意,某些荧光团(包括 PE 和 APC)会被甲醇损坏,因此不应在透化前添加。如果您不确定,请进行小规模实验。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
发布时间 2009 年 7 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:404
人
小鼠
使用与人 CD79A 蛋白的 Tyr188 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。此磷酸肽序列与小鼠 CD79A 蛋白的 Tyr182 周围区域相同。
B 细胞表面上存在的抗原受体含有由 CD79A 和 CD79B (分别又称作 Ig α 和 Ig β)组成的异二聚信号转导组分 (1,2)。这种受体复合体的存在是 B 细胞发育和功能必需的 (3)。总之,这两种蛋白质和相关的 B 细胞受体 (BCR) 在抗原结合后启动胞内信号转导 (4,5)。存在于 CD79A 胞内区中的基于免疫受体酪氨酸的活化基序 (ITAM) 似乎对其功能重要 (6)。抗原结合在 CD79A 和 CD79B 异二聚体的形成和受体相关激酶的后续激活之前发生 (7)。研究已经证实 CD79A 是 B 系淋巴母细胞性白血病的标记物 (8)。此外,研究者已经发现, CD79A (MB1) 基因中的突变与一些慢性 B 细胞淋巴细胞白血病病例中异常低水平的有功能 B 细胞受体相关 (9)。
探索与本品相关的通路。
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