反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 68, 70 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 BLNK 蛋白中 Tyr84 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
B 细胞连接蛋白 (BLNK) 也称 SLP-65 或 BASH,是一个接头蛋白分子,在 B 细胞激活和 B 细胞抗原受体 (BCR) 结合中发挥重要作用。BLNK 在 BCR 相关的 Syk 和下游信号转导级联之间发挥作用 (1,2)。BLNK 在氨基末端有多个 SH2 结合基序 (YXXP),在羧基末端有一个 SH2 结构域。结合 BCR 后,BLNK 在多个 YXXP 基序上被 Syk 磷酸化,包括 Tyr72、Tyr84、Tyr96 和 Tyr178 (1)。这些磷酸化基序为信号转导分子(如 BTK、PLCγ 和 Vav)提供停泊位点。这些信号转导分子通过它们的 SH2 结构域结合 BLNK,并一同激活下游信号转导通路 (3,4)。通过其 SH2 结构域,BLNK 还能与酪氨酸磷酸化的靶标蛋白(如 HPK1)相互作用,从而募集到 BCR 复合体以进行信号转导 (5)。
探索与本品相关的通路。
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