反应性 | H |
敏感性 | 转染性 |
MW (kDa) | 110-130, 125-140, 180-200 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫沉淀 | 1:50 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
本实验步骤适用于使用 Protein A agarose beads 对天然蛋白进行免疫沉淀,以进行蛋白质免疫印迹或激酶活性分析。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
10X 细胞裂解缓冲液:(#9803) 要制备 10 ml 的 1X 细胞裂解缓冲液,将 1 ml 细胞裂解缓冲液添加至 9 ml dH2O,并混合。
注意:使用前,请立即添加 1 mM PMSF (#8553)。
继续下述其中一项的具体步骤。
注意:为了最大限度减少变性 IgG 重链产生的遮盖作用 (~50 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb (#3677) 或 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)。为了最大限度减少变性 IgG 轻链产生的遮盖作用 (~25 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)
发布于 2008 年 12 月
修订于 2018 年 4 月
实验步骤编号:409
Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb 可免疫沉淀或转染水平的在Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) 发生磷酸化的 Axl/Mer/Tyro3 蛋白。该抗体可与其他磷酸化的酪氨酸蛋白发生交叉反应。
人
小鼠, 大鼠
使用与人 Axl/Mer 蛋白中 Tyr698/Tyr749 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Axl、Mer 和 Tyro3 是 TAM 受体酪氨酸激酶家族的三个成员,它们有一个共同 NCAM(神经黏附分子)相关细胞外域和一个保守的胞内酪氨酸激酶域。这些受体结合共同的同源维生素 K 依赖蛋白 GAS6 和蛋白 S,以激活下游信号转导通路 (1)。TAM 家族受体涉及免疫、神经、血管和生殖系统的发育,自身免疫性疾病、癌症耐药性和肿瘤免疫应答 (2-5)。Axl (Tyr698)、Axl (Tyr702)、Mer Tyr(749) 和 Tyro3 (Tyr681)是位于相应酪氨酸激酶结构域激活环的保守自磷酸化位点。这些位点的磷酸化对于各相应受体的全激酶激活是必需的 (6,7)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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