反应性 | H |
灵敏度 | 转染性 |
MW (kDa) | 25 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
小鼠, 大鼠
使用与人 Atg101 蛋白中 Ser11 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物免疫接种来产生单克隆抗体。
研究发现,Atg101 是 Atg13 的结合蛋白,Atg13 是自噬所需的 ULK1 丝氨酸-苏氨酸激酶复合体组分 (1-3)。自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (4,5)。一般在营养剥夺条件下自噬被激活,而自噬也与许多生理过程有关,包括发育、分化、神经退行性疾病、感染和癌症 (6)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,该机制还受大量自噬相关 (Atg) 基因的调节。ULK1 复合体包括 Atg13 和 FIP200,并且为饥饿诱导的自噬所需 (7-9)。Atg101 和 Atg13 之间的相互作用对 Atg13 和 ULK1 的稳定性和基础磷酸化非常重要 (1,2)。
已报告 Atg101 在 Ser11 被 ULK1 磷酸化 (10)。
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