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80722
Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
一抗
单克隆抗体

Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free) #80722

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Western Blotting Image 1: Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb(上图)或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691(下图)对未经处理 (-) 或已经 Human Platelet-Derived Growth Factor AA (hPDGF-AA) #8913(100 ng/ml,5 分钟;+)处理的 NIH/3T3 细胞与未经处理的 (-) LNCaP 和 PC-3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
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Immunofluorescence Image 1: Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (绿色)对经胰岛素(100 nM,15 分钟;左图)或 LY294002 #9901(50 μM,2 小时;右图)处理的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
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Flow Cytometry Image 1: Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free)
使用浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照组,使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb(实线)对未经处理(绿色)或经 LY294002 #9901、Wortmannin #9951 和 U0126 #9903 处理(蓝色)的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
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To Purchase # 80722SF
目录# 规格 价格 库存
80722SF
100 µg

支持性数据

反应性 H M R Mk
灵敏度
MW (kDa) 60
来源/同种型 兔 IgG

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

本产品是产品 #13038 的无载体版本。所有数据均使用相同的克隆抗体,是包含 BSA 和甘油的常规组分产品。

该制剂非常适用于需要专门或定制抗体标记的技术,包括荧光团、金属、镧系元素和寡核苷酸。不推荐用于 ChIP、ChIP-seq、CUT&RUN 或 CUT&Tag 检测。如果您需要用于染色质分析的无载体配方,请联系我们。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

剂型

以 1X PBS、无BSA 和叠氮化物形式提供。

本品的常规组分产品为 #13038

保存

储存于 -20°C 的温度下。此产品将在 -20°C 下冷冻,因此建议分装到一次性小瓶中,以避免多次冷冻/解冻循环。 可能存在轻微沉淀,轻轻涡旋可溶解。这不会干扰抗体性能。

特异性/灵敏度

仅当 Akt1 蛋白在 Thr308 位点被磷酸化时,Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (BSA and Azide Free) 才可检测 Akt1 蛋白的内源水平。该抗体在 Thr309 磷酸化后也可识别内源水平的 Akt2 蛋白,或者当 Thr305 磷酸化后可识别内源水平的 Akt3 蛋白。

物种反应性:

人, 小鼠, 大鼠, 猴

来源/纯化

使用与人 Akt1 蛋白的 Thr308 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

Akt 也称作 PKB 或 Rac,在控制存活和凋亡中发挥至关重要作用 (1-3)。这种蛋白激酶由胰岛素和多种生长和存活因子激活,并在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用 (2,3)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (4) ,以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。曾经功能难以捉摸的 PDK2 可在 Ser473 处磷酸化 Akt ,它被鉴定为在含 rictor 和 Sin1 的雷帕霉素中的非敏感复合体中哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) (5,6)。Akt 通过磷酸化和失活几种靶标(包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9)而抑制凋亡,进而促进细胞存活。PTEN 磷酸酶是 PI3K/Akt 信号转导通路的主要负向调节分子 (10)。LY294002 是特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。Akt 的另一个主要功能是通过磷酸化和失活 GSK-3α 和 β 调节糖原合成 (12,13)。Akt 还可以在胰岛素刺激转运葡萄糖中发挥作用 (12)。除其在存活和糖原合成中的作用外,Akt 还通过防止 GSK-3β 介导的磷酸化和 cyclin D1 降解 (14),并通过负向调节细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p27 Kip1 (15) 和 p21 Waf1/Cip1 (16),参与细胞周期调节。Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感性复合体中的 mTOR,在细胞生长中发挥至关重要作用 (17)。更重要的是,Akt 磷酸化并失活结节蛋白 (TSC2)(在 mTOR-raptor 复合体中 mTOR 的抑制分子)(18,19)。
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通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

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