反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 160-220 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫沉淀 | 1:50 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
本实验步骤适用于使用 Protein A agarose beads 对天然蛋白进行免疫沉淀,以进行蛋白质免疫印迹或激酶活性分析。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
10X 细胞裂解缓冲液:(#9803) 要制备 10 ml 的 1X 细胞裂解缓冲液,将 1 ml 细胞裂解缓冲液添加至 9 ml dH2O,并混合。
注意:使用前,请立即添加 1 mM PMSF (#8553)。
继续下述其中一项的具体步骤。
注意:为了最大限度减少变性 IgG 重链产生的遮盖作用 (~50 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb (#3677) 或 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)。为了最大限度减少变性 IgG 轻链产生的遮盖作用 (~25 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)
发布于 2008 年 12 月
修订于 2018 年 4 月
实验步骤编号:409
MRP3/ABCC3 (D8V8J) Rabbit mAb 可识别 MRP3 总蛋白的内源水平。
人, 小鼠, 大鼠
使用人 MRP3 蛋白的 Gly870 周围的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
MRP3/ABCC3 属于 ATP 结合盒 (ABC) 转运蛋白超家族。它是 MRP 亚家族的成员之一,在肝、胆囊、小肠、结肠、肾和肾上腺等多种器官中都有表达 (1-3)。MRP3 与多药耐药性有关 (1)。它促进有机阴离子(包括单阴离子胆汁酸和抗癌剂如 etoposide 和 paclitaxel)从肝和小肠排入血液 (4-7)。MRP3 的表达在胆汁淤积的人肝脏和大鼠肝脏中有所增加,这表明它在肝胆和肠肝胆汁循环中发挥作用,并且能保护肝脏免受有毒胆盐的影响 (2,8)。MRP3 表达还在肝脏缺少功能性 MRP2 的 Dubin-Johnson 综合征 (DJS) 患者体内有所上调,这表明在功能性 MRP2 缺失的情况下 MRP3 仍发挥代偿作用 (4)。
已经在肝细胞癌、原发性卵巢癌和成人急性淋巴母细胞性白血病 (ALL) 等不同癌症类型中检测到 MRP3 的表达升高 (9-11)。据报道 MRP3 的过表达是 ALL 和成人急性髓性白血病 (AML) 的预后因素 (11,12)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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