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48734
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit #48734

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Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb Antibody(实线)或浓度匹配的 Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control #53484(虚线)对未经处理(蓝色)或已经过 Chloroquine #14774(50 μM,18 小时;绿色)处理的 HCT-116 细胞进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb #9664 对经过细胞色素 C 处理的 Jurkat 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例在 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Cleaved Gasdermin D (Asp276) (E3E3P) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经 (-) 或经Lipopolysaccharides (LPS) #14011(50 ng/ml,4 小时;+)处理后再用 Nigericin (sodium salt) #66419(15 μM,指定时间;+)处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对野生型或 SQSTM1/p62 敲除型小鼠的 MEF 提取物进行蛋白质印迹分析。MEF SQSTM1/p62 KO 细胞由马萨诸塞州波士顿哈佛大学医学院的 Junying Yuan 博士提供。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb(上图)、总 MLKL (D6W1K) Rabbit mAb (Mouse Specific) #37705(中图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理的 (-) 或经过以下组合处理方法处理的 L-929 细胞提取物进行蛋白质印迹分析:Z-VAD(20 μM,先于其他混合物 30 分钟添加;+)、Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/ml,4 小时;+)、SM-164(100 nM,4 小时;+)和 necrostatin-1(Nec-1,50 μM,4 小时;+)。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb(上图)、RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb #3493(中图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或用 Z-VAD(OMe)-FMK #60332(20 μM,30 分钟)处理然后用 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/ml,7 小时)和 SM-164(100 nM,7小时)处理的野生型 (WT) MEF 或 MEF/RIPK1 敲除型 (KO) 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。MEF/RIPK1 KO 细胞由马萨诸塞州波士顿哈佛医学院的 Junying Yuan 博士惠赠。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 Cleaved-IL-1β (Asp117) (D7V2A) Rabbit mAb (Mouse Specific)(上图)或总 IL-1β (E3H1Z) Rabbit mAb (Mouse Specific) #12507(下图),对未经处理 (-) 或已经过 LPS #14011(50 ng/ml,4 小时)处理后用尼日利亚菌素(15 μM,45 分钟)处理 (+) 的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的细胞提取物和培养基进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 8
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb #83506(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或经过 Chloroquine #14774(50 μM,18 小时)处理的 HCT 116 和 HCT 116 LC3B 敲除型细胞进行蛋白质印迹分析。HCT 116 敲除型细胞中没有信号,这证实了抗体对 LC3B 的特异性。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 10
对使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb #83506(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (E4L7M) XP® Rabbit mAb #80788(右图,红色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠小脑组织进行共聚焦免疫荧光分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 11
对使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb #83506(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (E4L7M) XP® Rabbit mAb #80788(右图,红色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠脑桥组织进行共聚焦免疫荧光分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Phospho-RIP3 (Thr231/Ser232) (E7S1R) Rabbit mAb(上图)、RIP3 (D8J3L) Rabbit mAb #15828(中图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理 (-) 或经过以下所示的处理方法组合处理的 L-929 细胞 进行蛋白质印迹分析:Z-VAD (20 μM,先于其他化合物之前 30 分钟添加;+)、SM-164(100 nM,3 小时;+)和 mouse TNF-α(20 ng/ml,3 小时;+)。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理 (-) 或经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时)处理的血清饥饿 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 对未经或经 staurosporine #9953(1uM,3 小时)或 etoposide #2200(25uM,5 小时)处理的 C6(大鼠)、NIH/3T3(小鼠)和 Jurkat(人源)提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理的 (-) 或经氯奎宁 #14774(50 μM,过夜)处理的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb(绿色)对未处理的(左图)、已经 Z-VAD(20 μM,30 分钟)预处理后再用 SM-164 (100 nM) 和 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/mL,2.5 小时;中间)处理,随后用 λ 磷酸酶处理(右图)的 L-929 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。红色 = Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087(DNA 荧光染料)。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 17
使用 Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb(上图)、RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb #3493(中图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理 (-) 或经 Z-VAD(OMe)-FMK #60332(20 μM,30 分钟)处理然后经 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/ml,适用时间)和 SM-164(100 nM,适用时间)对 L-929 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 18
对经 LPS #14011(50 ng/ml,4 小时)处理,然后用尼日利亚菌素(15 μM,45 分钟)处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的培养基提取物中剪切活化的 IL-1β (Asp117) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900,泳道 3 为 Cleaved-IL-1β (Asp117) (E7V2A) 兔单克隆抗体(特定小鼠)。使用 Cleaved-IL-1β (Asp117) (E7V2A) 兔单克隆抗体(特定小鼠)进行蛋白印迹实验。抗兔 IgG, HRP-链接抗体 #7074 用作二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对未经 (-) 或已经氯喹 #14774(50 μM,过夜;+)处理的 HeLa、C2C12 和 KNRK 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 Phospho-RIP3 (Thr231/Ser232) (E7S1R) 兔单克隆抗体(绿色)对未处理的(左图)、经 Z-VAD(20 μM,30 分钟)预处理后再经 SM-164 (100 nM) 和 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/mL,2.25 小时;中间)处理,或经 Z-VAD 预处理后再经 SM-164 和 hTNF-α 处理,随后经 λ 磷酸酶处理(右图)的 L-929 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理 (-) 或已经过 Staurosporine #9953(1 μM,6 小时;+)处理的血清饥饿 H-4-II-E 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 22
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 对未经或经 etoposide(25uM, 5 小时)处理的 Jurkat 细胞的提取物进行免疫沉淀法。使用同一抗体进行蛋白质进行印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 23
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 24
采用 Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb(上图)、RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb #3493(中图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或用 Z-VAD(OMe)-FMK #60332 (20 μM,30 分钟)处理然后用 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/ml,4.5 小时)和 SM-164(100 nM,4.5小时)处理的 H9c2(2-1) 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 25
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对 HeLa 细胞或已敲除 LC3B 的 HeLa 细胞 (HeLa/LC3B KO) 的提取物进行蛋白印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 26
对经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时)处理的 Neuro-2a 细胞提取物的裂解活化 PARP (Asp214) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb。使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 27
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific)(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理的 (-) 或经 Earles 基础盐溶液(EBSS;4 小时;+)处理的 MEF 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 28
对经 Z-VAD(OMe)-FMK #60332(20 μM,30分钟)然后由 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178(20 ng/ml,2小时)和 SM-164(100 nM,2小时)处理的 L-929 细胞提取物的 phospho-RIP (Ser166) 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% Input,泳道 2 为兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900,泳道 3 为 Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb。使用 Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 29
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体(下图)对未处理的 (-) 或用 Earle's 平衡盐溶液 (EBSS)(规定时间)饥饿的 A549 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 30
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 对未经处理(左图,阴性)或已经过 Staurosporine #9953(右图,阳性)处理的石蜡包埋的 3T3 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 31
在对照肽(左)或 Cleaved Caspase-3 (Asp175) Blocking Peptide (#1050)(右)存在的情况下,使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胚胎进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 32
对 L-929 细胞提取物的 QSTM1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific)。使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 33
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体(上图)或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对未处理的 (-) 或已经 Torin 1 #14379(250 nM,5 小时;+)处理的 MCF7 和 Raji 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 34
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 E14 大鼠胚胎进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 35
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 在 SignalSlide® Cleaved Caspase-3 IHC Controls #8104 上对石蜡包埋的未经处理(左图)或经过依托泊苷处理(右图)的 Jurkat 细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 36
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的 MEF 野生型细胞沉淀物(左图,阳性)或 MEF SQSTM1/p62 KO 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。MEF SQSTM1/p62 KO 细胞由马萨诸塞州波士顿哈佛大学医学院的 Junying Yuan 博士提供。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 37
对用氯喹 # 14774(50 μM;过夜)处理的 HeLa 细胞的 LC3B 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 敲入,泳道 2 为小鼠 (G3A1) 单克隆抗体 IgG1 同型对照,泳道 3 为 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体。使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体进行蛋白印迹实验。Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 用作二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 38
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 对未经处理(左图,阴性)或经 Staurosporine #9953(右图,阳性)处理的石蜡包埋的 H-4-II-E 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 39
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb,对石蜡包埋的小鼠胚胎进行免疫组织化学染色,以显示凋亡细胞细胞浆定位。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 40
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠前胃细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 41
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 42
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠卵巢进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 43
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠肾脏细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 44
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人食管癌细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 45
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脾脏进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 46
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠脾细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 47
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 48
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb(绿色)对未经处理(左图,阴性)或经 Staurosporine #9953(1 μM, 3 小时;右图,阳性)处理的 Neuro-2a 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 49
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的大鼠脾细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 50
使用 LC3B (E5Q2K) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 51
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未经处理(蓝色)或经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时;绿色)处理的血清饥饿 Neuro-2a 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 52
使用 Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb(绿色)标记的且未经(左)或经(右)Staurosporine #9953 处理的 HT-29 细胞的共聚焦免疫荧光图像。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin #8953(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 53
使用 SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 对石蜡包埋的小鼠小肠细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 54
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 对未经处理(左上图)或经过 Chloroquine #14774 处理(右上图)的石蜡包埋的 HCT116 细胞沉淀物和未经处理(左下图)或经过 Chloroquine #14774 处理(右下图)的 HCT116 LC3B 敲除型细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 55
使用 Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未经处理(蓝色)或经 Staurosporine #9953(1 μM,3 小时;绿色)处理的血清饥饿 H-4-II-E 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 56
使用与非特异性的阴性对照抗体(红色)作为 Caspase-3(Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 的对照,对未经(蓝色)或已经(绿色)etoposide #2200 处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞术分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 57
使用 SQSTM1 (D6M5X) Rabbit mAb(绿色)对未经(左图)或已经 Chloroquine #14774(50 μM,18 小时;中间)处理的野生型 MEF 和经 氯喹 处理(右图)的 SQSTM1/p62 敲除型 MEF 进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。MEF SQSTM1/p62 KO 细胞由马萨诸塞州波士顿哈佛大学医学院的 Junying Yuan 博士提供。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 58
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人脑细胞进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 59
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 对石蜡包埋的 KARPAS 299 细胞沉淀物(左图,高表达)或 VCaP 细胞沉淀物(右图,低表达)进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 60
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 对石蜡包埋的未处理的(左图)或经过 Chloroquine #14774 处理的(右图)HeLa 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 61
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 对石蜡包埋的人正常脾进行免疫组织化学分析。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 62
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb(绿色)对未经处理(左图)或经过 Chloroquine #14774(50 µM,过夜)(中图)处理的 HCT 116 细胞或经过 Chloroquine #14774(50 µM,过夜)(右图)处理的 LC3B HCT 116 敲除型细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970(红色)标记,胞核用 DAPI #4083(蓝色)标记。
Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 63
使用 LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 或浓度匹配的 Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control #53484(虚线)对野生型 HCT-116 细胞(绿色,高表达)或敲除型 LC3B(蓝色,阴性)进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
To Purchase # 48734T
目录# 规格 价格 库存
48734T
1 个试剂盒(9 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 9664 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R Mk 17, 19 兔 IgG
Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 94885 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
M R 89 兔 IgG
Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb 53286 20 µl
  • WB
  • IP
M R 78 兔 IgG
Phospho-RIP3 (Thr231/Ser232) (E7S1R) Rabbit mAb 91702 20 µl
  • WB
  • IF
M 46-62 兔 IgG
Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb 37333 20 µl
  • WB
  • IF
M 54 兔 IgG
Cleaved Gasdermin D (Asp276) (E3E3P) Rabbit mAb 10137 20 µl
  • WB
M 31 兔 IgG
Cleaved-IL-1β (Asp117) (E7V2A) Rabbit mAb (Mouse Specific) 63124 20 µl
  • WB
  • IP
M 17 兔 IgG
LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 83506 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R 14, 16 小鼠 IgG2b
SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 23214 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
M R 62 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

Mouse Reactive Cell Death and Autophagy Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法来检测细胞凋亡、坏死性凋亡、细胞焦亡和自噬中的常见读出。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

Mouse Reactive Cell Death 和 Autophagy Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 可检测 Asp175 附近裂解活化产生的内源水平的活化 caspase-3 中大片段 (17/19 kDa) 。该抗体无法检测全长 caspase-3 或其他剪切的半胱天冬酶。Cleaved PARP (Asp214) (D6X6X) Rabbit mAb 仅在 Asp214 位点被裂解时才可识别 PARP 大片段 (89 kDa) 的内源水平。仅当在 Asp276 位点裂解时,Cleaved Gasdermin D (Asp276) (E3E3P) Rabbit mAb 才可检测小鼠 Gasdermin D 蛋白的内源水平。Cleaved-IL-1β (Asp117) (E7V2A) 兔单克隆抗体(特定小鼠)可检测仅在 Asp117 位点被剪切活化的小鼠 IL-1β 蛋白的内源水平。Phospho-RIP3 (Thr231/Ser232) (E7S1R) 兔单克隆抗体可检测仅在 Thr231/Ser232 位点被磷酸化的 RIP3 蛋白的内源水平。该抗体可能无法检测仅在 Thr231 或 Ser232 被单磷酸化的 RIP3。Phospho-RIP (Ser166) (E7G6O) Rabbit mAb 仅在 RIP 蛋白在 Ser166 位点被磷酸化时方可识别内源水平的 RIP 蛋白。仅当 MLKL 蛋白在 Ser345 位点被磷酸化时,Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb 才可检测小鼠 MLKL 蛋白的内源水平。在免疫荧光 (IF-IC) 实验中观察到微弱、非特异性胞核染色。LC3B (E5Q2K) Mouse mAb 可检测 LC3B 的 I 型和 II 型。检测不到与其他家族成员的交叉反应性。SQSTM1/p62 (D6M5X) Rabbit mAb (Rodent Specific) 可识别内源水平的啮齿类 SQSTM1/p62 总蛋白。

来源/纯化

使用与人 caspase-3 的 Asp175、啮齿动物 PARP 的 Asp214、小鼠 Gasdermin D 的 Asp276、小鼠 IL-1β 的 Asp117、小鼠 SQSTM1/p62 的 Gly300 周围残基、人 LC3B 氨基末端附近的残基相对应的合成肽以及鼠 RIP 的 Ser166、鼠 RIP3 的 Thr231/Ser232、鼠 MLKL 的 Ser345 相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

已根据不同的形态学和生化途径对受调节的细胞死亡进行了分类 (1)。I 型细胞死亡或凋亡的特征在于胞质收缩、染色质凝集、核碎裂、质膜起泡和死细胞吞噬更新。凋亡可通过涉及细胞外因子的外在途径发生,包括死亡受体的激活,或者通过涉及细胞内扰动的内在途径发生,包括线粒体外膜通透性 (2)。这两种凋亡途径均导致 caspase 的激活,caspase 是一类半胱氨酸蛋白酶,被合成为含有原结构域的无活性酶原,随后是大的 (p20) 和小的 (p10) 亚基,它们以级联方式被蛋白水解激活。Caspase-3 是一种关键的下游蛋白酶,可通过外在和内在的凋亡途径激活,并裂解与细胞分解有关的大量蛋白质,包括聚(腺苷二磷酸 -核糖)聚合酶 (PARP),即与 DNA 损伤应答有关的蛋白质。
 
II 型细胞死亡或自噬表现为广泛的细胞质空泡化,并像凋亡一样,可能包括吞噬更新。自噬是一种分解代谢过程,可降解包括蛋白质聚集体、受损细胞器和病原体在内的细胞组分 (3)。该过程涉及将这些组分吞噬入双层膜结构,即自噬小体,其与溶酶体融合以降解。自噬需要并可以通过 LC3 家族成员(如 LC3B)从 I 型转化为脂化的 II 型形式的转化来监测,该脂化 II 型形式并入自噬体膜并与多种运货受体结合。SQSTM1/p62 等运货受体将 LC3 与靶向降解的泛素化蛋白结合在一起。在此过程中,SQSTM1/p62也会降解,因此它的表达经常用于监测此过程。

III 型细胞死亡或坏死表现为质膜通透性以及细胞肿胀和碎裂,缺乏明显的吞噬反应,继而导致炎症信号传导,并伴随着损伤相关分子模式 (DAMP) 的释放。坏死可由多种调控途径触发,包括坏死性凋亡和细胞焦亡。坏死性凋亡受 RIP 和 RIP3 激酶活性和 MLKL 的孔形成能力的调节 (4)。坏死性凋亡需要激活 RIP3,然后 RIP3 磷酸化 Ser358(小鼠中的 Ser345)的 MLKL。MLKL 的磷酸化导致与细胞膨胀和 DAMP 的分泌有关的孔复合物的产生。RIP3 激活是通过几个 RIP 同型相互作用基序 (RHIM) 结构域相互作用触发的,包括 RIP、TRIF 和 ZBP1,并导致 RIP3 在 Ser227(小鼠中的 Thr231/Ser232)的磷酸化。典型坏死性凋亡信号转导是由 RIP 介导的,它可以被 necrostatin(一种直接抑制 RIP 激酶活性的小分子)抑制。RIP 激活可通过包括 Ser166 在内的自磷酸化位点监测。细胞焦亡通常在先天免疫系统的细胞中被诱导,其特征是对 Gasdermin D 的裂解 (5)。在被炎性 caspase (Caspase-1, -4, -5) 剪切后产生的 Gastermin D 的氨基末端片段低聚形成孔。Gasdermin D 的典型剪切通过两步过程进行。第一步涉及靶标如 NLRP3 以及 IL-1β 和 IL-18 前体的转录调控。在第二个执行步骤中,通过形成炎性体复合物激活 Caspase-1。活化的 Caspase-1 将 Gasdermin D 以及 IL-1β 和 IL-18 裂解为它们的成熟形式,并且这些活性细胞因子通过 Gasdermin D 形成的孔分泌。
  1. Galluzzi, L. et al. (2018) Cell Death Differ 25, 486-541.
  2. Green, D.R. (1998) Cell 94, 695-8.
  3. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ 12 Suppl 2, 1509-18.
  4. Shan, B. et al. (2018) Genes Dev 32, 327-40.
  5. Shi, J. et al. (2017) Trends Biochem Sci 42, 245-54.

通路与蛋白质

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