试剂盒使用信息
实验步骤
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3892: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法, 流式细胞术
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7074: 蛋白印迹实验
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8243: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫荧光法
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17198: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠), 免疫组织化学 (Leica® Bond™), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法, 流式细胞术
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31718: 蛋白印迹实验, 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法*, 流式细胞术
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67824: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法, 流式细胞术
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69854: 蛋白印迹实验, 免疫荧光法, 免疫荧光法*
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90205: 蛋白印迹实验, IF-F Citrate Retrieval (Rabbit), 免疫荧光法, 流式细胞术
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90840: 免疫荧光法
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97585: 蛋白印迹实验, 免疫组织化学 (Leica® Bond™), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法
产品说明
Mouse Reactive Alzheimer's Disease Model Microglia Phenotyping IF Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法,可通过免疫荧光和/或蛋白质印迹法检测阿尔茨海默病 (AD) β-淀粉样蛋白小鼠模型中的小胶质细胞蛋白。该试剂盒包含的每种一抗足以进行至少 20 次 IF-F 测试或 2 次蛋白质印迹实验。
特异性/灵敏度
Mouse Reactive Alzheimer's Disease Model Microglia Phenotyping IF Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb 可检测小鼠模型中转基因表达的人 APP 和多种 Aβ 同工型,例如 Aβ-37、Aβ-38、Aβ-39、 Aβ-40 和 Aβ-42。经计算,HS1 大小为 54 kDa,但是在 SDS-PAGE 凝胶上的表观分子量为 80 kDa。Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb 可检测组织蛋白酶 B 的重链亚基。 Cathepsin D (E179) Antibody 可检测组织蛋白酶原 D、组织蛋白酶原 D 和成熟组织蛋白酶 D 蛋白重链亚基的内源水平 .
来源/纯化
使用与人 Iba1/AIF-1 蛋白的 Ala139、小鼠 HS1 蛋白的 Leu310、小鼠 CD11c 蛋白的 Ala1153 和小鼠组织蛋白酶 D 蛋白的 Glu179 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。还使用人组织蛋白酶 B 蛋白和小鼠 ASC/TMS1 蛋白的重组重链亚基以及人 β-淀粉样肽 (Aβ)、人 TMEM119 和小鼠 GPNMB 蛋白的氨基末端产生抗体。Cathepsin D (E179) Antibody 通过肽亲和层析纯化。
背景
使用大量神经系统疾病和衰老模型的 RNA-seq 数据发现了不同的小胶质细胞激活状态。在阿尔茨海默病 (AD) 和 AD 患者的小鼠模型中,独特的小胶质细胞分子特征与疾病进展相关 (1-3)。AD 进展与释放的 Aβ 片段的细胞外沉积和积累相关,这些片段源自跨膜糖蛋白淀粉样蛋白 β (Aβ) 前体蛋白 (APP),形成淀粉样斑块,这是 AD 的病理标志物 (4)。小胶质细胞是大脑的常驻巨噬细胞,会导致神经退行性疾病 (5)。离子钙接头蛋白分子 1 (Iba1),也称为同种异体移植炎症因子 1 (AIF-1),在单核细胞系细胞中也表达独特,因此被广泛用作大脑和其他组织中的小胶质细胞/巨噬细胞的标记物(6,7)。HS1 (HCLS1, LckBP1, p75) 是一种蛋白激酶底物,仅在造血来源的组织和细胞中表达,也在小胶质细胞中表达 (8,9)。跨膜蛋白119 (TMEM119) 是功能未知的细胞表面蛋白,仅由髓系和神经细胞的小胶质细胞亚群表达 (10)。具有分支和变形虫形态的 Iba1+小胶质细胞表达 TMEM119,而 Iba1+巨噬细胞为 TMEM119 阴性 (11)。
TMEM119 和其他稳态基因已被证明在小胶质细胞中被下调。除了小胶质细胞的一般标志物外,一些小胶质细胞基因在疾病进展过程中被上调 (12)。CD11c(整合素 αX,ITGAX)是一种与 CD18(整合素 β2)形成 α/β 异二聚体的跨膜糖蛋白,它会与各种细胞外基质分子和细胞表面蛋白相互作用 (13)。CD11c 阳性小胶质细胞与淀粉样斑块转录相关 (14)。此外,其他基因也以类似方式上调。糖蛋白非转移性基因 B (GPNMB) 是在许多类型癌中过表达的 I 型跨膜糖蛋白。GPNMB 糖蛋白参与许多生理过程,包括介导晚期黑素体向角质形成细胞的转运 (9,15)。组织蛋白酶 B 和 D 分别是广泛表达的半胱氨酸和天冬氨酰蛋白酶,参与蛋白质的正常降解 (16,17)。已发现 ASC/TMS1 是炎症信号传导的关键组成部分,它与促炎信号转导 相关联并激活 caspase-1,并可能直接促成淀粉样蛋白斑块的形成 (18,19)。
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通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
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