试剂盒使用信息
实验步骤
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3434: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠), 免疫荧光法
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3892: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法, 流式细胞术
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7074: 蛋白印迹实验
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8661: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 流式细胞术
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31718: 蛋白印迹实验, 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法*, 流式细胞术
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36169: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫荧光法, 流式细胞术, ChIP(磁珠), ChIP-seq, CUT&RUN 测定法
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67824: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 免疫荧光法, 流式细胞术
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76437: 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法*, 流式细胞术, 流式细胞术活细胞非偶联兔抗
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86985: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖)
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87985: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法
产品说明
Microglia Neurodegeneration Module Antibody Sampler Kit 提供一种经济合算的方法来检测通过蛋白印迹法和/或免疫荧光法发现为神经退化期间小胶质细胞活性标记物的蛋白。
特异性/灵敏度
Microglia Neurodegeneration Module Antibody Sampler Kit 中的每种抗体都能检测其靶蛋白的内源水平。HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific) 无法检测人 HS1 蛋白。经计算,HS1 大小为 54 kDa,但是在 SDS-PAGE 凝胶上的表观分子量为 80 kDa。Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb 可检测 cathepsin B 总蛋白的内源水平以及 cathepsin B 的重链亚基。Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb 可检测仅在 Pro564 被羟化的 HIF-1α 的内源水平,并且可能会与其他过表达的脯氨酸羟化蛋白发生交叉反应。Axl (C89E7) Rabbit mAb 不会与 Tyro3 发生交叉反应。
来源/纯化
使用与小鼠 HS1 中 Leu310、人 HIF-1α 中 Leu478 和人 Galectin-3/LGALS3 中氨基末端周围的残基相对应的合成肽、人 HIF-1α 中 Pro564 周围的羟化肽以及对小鼠 ASC/TMS1、人 Axl、人 CD68 和人 cathepsin B 蛋白的重链亚基具有特异性的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
针对已批准应用,采用优化比率结合单个兔单克隆体而制备 MultiMab™ 兔单克隆混合抗体。该产品经优化后可通过蛋白印迹法检测作为单体和二聚体的 CD68,并且通过使用重组人 CD68 蛋白对动物进行免疫接种来产生。
背景
使用大量神经系统疾病和衰老模型的 RNA-seq 数据发现了不同的小胶质细胞激活状态。这些激活状态被分为与增殖、神经退化、干扰素关系和 LPS 关系等相对应的模型 (1)。以往使用 RNA-seq 发现特定脑细胞类型的标记物的研究表明,HS1 和 ASC/TMS1 有用且是研究小胶质细胞的专门工具 (2)。HS1 是一种仅在造血源性组织和细胞中表达的蛋白激酶底物 (3),并且 ASC/TMS1 被发现是一种关键的炎症信号转导组分,并在出现促炎信号后结合并激活 caspase-1 (4)。
CD68 是一种常见的巨噬细胞系细胞标记物;在溶酶体中发现它的表达使其成为活化吞噬小胶质细胞的一种有用标记物 (5)。Galectin-3 经证实可调控神经退行性疾病中的炎症反应,小胶质细胞在炎症刺激下会释放这种物质 (6)。Cathepsin B 是一种广泛表达的半胱氨酸肽,位于溶酶体,并在其中被加工和分泌,在小胶质细胞介导的神经元死亡中起到作用 (7)。缺氧诱导因子 1 (HIF-1α) 是一种负责适应低氧环境的转录因子,其下游效应已在许多神经退行性疾病中得到证实。在常氧条件下,HIF-1α 是会被脯氨酸羟化,导致泛素介导的降解 (8)。Axl 是一种结合 Gas6 的受体酪氨酸激酶,会刺激对小胶质细胞炎性刺激后的吞噬反应的调节作用 (9)。
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Friedman, B.A. et al. (2018) Cell Rep 22, 832-47.
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通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
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