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43698
Mediator Complex Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Mediator Complex Antibody Sampler Kit #43698

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Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 MED26 (D4B1X) Rabbit mAb 对 Raji、HeLa 和 Daudi 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 对 HeLa、KNRK 和 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb 对 HeLa、Raw 264.7 和 COS-7 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 MED1 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 7
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 8
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb(泳道 3)对 Jurkat 细胞提取物中的 MED12 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 Hela 细胞中提取的交联染色质,在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 12上 ZNF740 基因内结合。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 10
对 HeLa 细胞提取物 CDK8 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10 % input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb。使用 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 11
对来自 HeLa 细胞提取物的 MED1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10 % 输入,泳道 2 是 Normal Rabbit IgG #2729,而泳道 3 是 MED1 Antibody。使用 MED1 Antibody 进行蛋白质印迹分析。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对来自对照 HCT 116细胞(泳道 1)或细胞周期蛋白 C 敲除型 HCT 116 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。细胞周期蛋白 C 敲除型 HCT 116 细胞中信号的减少证实了抗体对细胞周期蛋白 C 的特异性。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 HeLa 细胞(热休克 1小时)中提取的交联染色质,在加入 MED26 (D4B1X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human c-Myc Intron 1 Primers #14905、SimpleChIP® Human HSP70 Intron 1 Primers #14023和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集 DNA 进行量化。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 Hela 细胞中提取的交联染色质,在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 7(上图)内的结合,包括 Rpb1-NTD 的已知靶标基因 ACTB(中图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)和染色体 12 中的 ZNF740 基因。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 15
对 HCT 116 细胞提取物的细胞周期蛋白 C 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% input、泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 以及 泳道 3 是 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对 Hela 细胞中提取的交联染色质,在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP® Human γ-Actin Promoter Primers #5037、SimpleChIP® Human AFM1 Intron 1 Primers #5098 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 17
使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对野生型(绿色)或细胞周期蛋白 C 敲除型(蓝色)HCT 116 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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43698T
1 个试剂盒(6 x 20 微升)

产品说明

Mediator Complex Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法来评估介质复合体蛋白的总水平。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

Mediator Complex Antibody Sampler Kit 中的每一种抗体可检测其靶标蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 MED12 蛋白中 Gly1813、人 MED26 蛋白中 Pro120、人 CDK8 蛋白中 Pro455、人 cyclin C 蛋白中 Pro263 以及人 Rpb1 蛋白中 Pro613 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 MED1 蛋白中 His591 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

哺乳动物的介质复合物是一种多亚基蛋白质复合物,其作用是将信号从转录因子传递到 RNA 聚合酶 II(Pol II)和基础转录机制。换句话说,介质充当转录调控的集中枢纽或整合者(在1,2中进行了综述)。多项研究表明,介质功能包括表观遗传调节、转录延长、转录终止、mRNA 处理、非编码 RNA 活化和超增强剂形成。通过这些功能,介质有助于调节许多生物过程,包括胰岛素信号转导 (3)、NF-κB 依赖性信号转导 (4)、干细胞多能性和自我更新 (5,6) 以及结肠癌细胞增殖 (7,8)。介质复合物由 31 蛋白亚基组成,可以分为四个不同的模块:头部、中部、尾部和 CDK8 激酶模块。CDK8 激酶模块包含 CDK8、cyclin C、MED12 和 MED13 亚基,被认为能充当分子开关,可磷酸化 RNA 聚合酶 II 的大亚基 Rpb1 的 C 末端结构域(CTD),从而抑制 Pol II 募集和转录启动(9,10)。
  1. Malik, S. and Roeder, R.G. (2005) Trends Biochem Sci 30, 256-63.
  2. Soutourina, J. (2018) Nat Rev Mol Cell Biol 19, 262-274.
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  6. Varelas, X. et al. (2008) Nat Cell Biol 10, 837-48.
  7. Firestein, R. et al. (2008) Nature 455, 547-51.
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  10. Knuesel, M.T. et al. (2009) Genes Dev 23, 439-51.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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