Name: Mediator Complex Antibody Sampler Kit
Price: 518.00 EU
Availability: InStock

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Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 1 — 使用 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 2 — 使用 MED26 (D4B1X) Rabbit mAb 对 Raji、HeLa 和 Daudi 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 3 — 使用 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 对 HeLa、KNRK 和 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 4 — 使用 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb 对 HeLa、Raw 264.7 和 COS-7 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 5 — 使用 MED1 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 6 — 使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 7 — 使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb #68179（绿色）、DyLight^™ 650 Phalloidin #12956（红色）和 DAPI #4083（蓝色）对对照 HCT 116 细胞（左图）或 CRISPR/Cas9 Cyclin C 敲除型 (KO) HCT 116 细胞（右图）进行共聚焦免疫荧光分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 8 — 一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO^®，在酶催化分解期间发光。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 9 — 使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（泳道 2）或 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb（泳道 3）对 Jurkat 细胞提取物中的 MED12 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 MED12 (D9K5J) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 10 — 使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 12上 ZNF740 基因内结合。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 11 — 对 HeLa 细胞提取物 CDK8 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10 % input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb XP^® Isotype Control #3900，泳道 3 为 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb。使用 CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 12 — 对来自 HeLa 细胞提取物的 MED1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10 % 输入，泳道 2 是 Normal Rabbit IgG #2729，而泳道 3 是 MED1 Antibody。使用 MED1 Antibody 进行蛋白质印迹分析。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 13 — 使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb（上图）或 GAPDH (D16H11) XP^® Rabbit mAb #5174（下图）对来自对照 HCT 116细胞（泳道 1）或细胞周期蛋白 C 敲除型 HCT 116 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。细胞周期蛋白 C 敲除型 HCT 116 细胞中信号的减少证实了抗体对细胞周期蛋白 C 的特异性。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 14 — 使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 HeLa 细胞（热休克 1小时）中提取的交联染色质，在加入 MED26 (D4B1X) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP^® Human c-Myc Intron 1 Primers #14905、SimpleChIP^® Human HSP70 Intron 1 Primers #14023和 SimpleChIP^® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 15 — 使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 7（上图）内的结合，包括 Rpb1-NTD 的已知靶标基因 ACTB（中图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）和染色体 12 中的 ZNF740 基因。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 16 — 对 HCT 116 细胞提取物的细胞周期蛋白 C 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% input、泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900 以及泳道 3 是 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 17 — 使用 SimpleChIP^® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP^® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP^® Human γ-Actin Promoter Primers #5037、SimpleChIP^® Human AFM1 Intron 1 Primers #5098 和 SimpleChIP^® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。

Mediator Complex Antibody Sampler Kit: Image 18 — 使用 Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP^® Isotype Control #3900（虚线）对野生型（绿色）或细胞周期蛋白 C 敲除型（蓝色）HCT 116 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor^® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

图像库

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To Purchase # 43698T

目录#	规格	价格	库存
43698T	1 个试剂盒（6 x 20 微升）

产品包括
相关产品

产品包括	数量	应用	反应性	MW (kDa)	同型
MED1 Antibody 51613	20 µl	WB IP	H M R Mk	220	兔
MED12 (D9K5J) Rabbit mAb 14360	20 µl	WB IP	H M R Mk	240	兔 IgG
MED26 (D4B1X) Rabbit mAb 14950	20 µl	WB IP ChIP	H	70	兔 IgG
CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb 17395	20 µl	WB IP	H M Mk	53	兔 IgG
Cyclin C (E6V4Z) Rabbit mAb 68179	20 µl	WB IP IF F	H M	30	兔 IgG
Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb 14958	20 µl	WB ChIP	H M R Mk	250	兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074	100 µl	WB	Rab		山羊

试剂盒使用信息

实验步骤

7074: 蛋白印迹实验
14360: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）
14950: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（琼脂糖）, ChIP（磁珠）
14958: 蛋白印迹实验, ChIP（磁珠）, ChIP-seq
17395: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（磁珠）
51613: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（磁珠）
68179: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法（磁珠）, 免疫荧光法, 流式细胞术

产品说明

Mediator Complex Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法来评估介质复合体蛋白的总水平。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

Mediator Complex Antibody Sampler Kit 中的每一种抗体可检测其靶标蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 MED12 蛋白中 Gly1813、人 MED26 蛋白中 Pro120、人 CDK8 蛋白中 Pro455、人 cyclin C 蛋白中 Pro263 以及人 Rpb1 蛋白中 Pro613 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 MED1 蛋白中 His591 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

哺乳动物中介体复合物是一种多亚基蛋白质复合体，其作用是中继来自转录因子的信号至 RNA 聚合酶 II（Pol II）和基础转录分子组。换句话说，介质充当转录调控的集中枢纽或整合者（在1,2中进行了综述）。多项研究表明，中介体功能包括表观遗传调节、转录性延伸、转录终止、mRNA 加工、非编码性 RNA 激活和超级增强子形成。通过这些功能，中介体有助于调节许多生物过程，包括胰岛素信号转导 (3)、NF-κB 依赖性信号转导 (4)、干细胞多能性和自我更新 (5,6) 以及结肠癌细胞增殖 (7,8)。介质复合体由 31 蛋白亚基组成，可以分为四个不同的模块：头部、中部、尾部和 CDK8 激酶模块。CDK8 激酶模块包含 CDK8、细胞周期蛋白 C、MED12 和 MED13 亚基，并且人们认为其充当分子开关，使 RNA 聚合酶 II 大亚基—— Rpb1 的 C 末端结构域 (CTD) 磷酸化，以抑制 Pol II 召集和转录启动（9,10）。

通路

探索与本品相关的通路。

数据库链接

UniProt ID： P24863 ， Q93074 ， O95402 ， P49336 ， P24928 ， Q15648

Entrez-Gene Id: 892 , 9968 , 9441 , 1024 , 5430 , 5469

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Mediator Complex Antibody Sampler Kit #43698