反应性 | M |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 125, 142 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
小鼠
使用与小鼠 MAP1S 蛋白中 Gly508 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
MAP1S 是微管相关蛋白(MAP)家族的成员。MAP 家族中至少有十种蛋白质,包括 MAP1A、MAP1B、MAP1S、MAP2、MAP6、MAP7、MAP9、Tau、 DCLK 和 DCX。MAP1 亚家族成员主要在脑细胞中表达,调节细胞中的几种生理过程,包括细胞骨架调节,在某些情况下是能量依赖性的,包括其他 MAP 家族成员和其他细胞骨架蛋白的自磷酸化和磷酸化(1,2)。MAP1 家族成员已被鉴定为由全长(FL),至少一条重链(HC)、一条轻链(LC)以及某些成员中的短链(SC)组成的高分子量蛋白( 2,3)。FL-MAP1S 由 HC 和 LC 组成,形成活性 MAP1S 配合物。LC 结合、捆束并稳定微管,而 HC 调节 LC(2)的活性。MAP1S 还与 Nemitin(富含神经元的 MAP 相互作用蛋白)相互作用,增强了细胞骨架的调节作用(4)。
MAP1S 通过与线粒体相关的富含亮氨酸的 PPR 基序蛋白(LRPPRC)相互作用,促进线粒体的稳定。MAP1S 调节泛素化过程,例如自噬小体的生物发生和蛋白质清除。这些过程是 MAP1S 同工型(5)。升高的 MAP1S 水平会增强自噬作用,以消除与 p62 相关的聚集体和功能异常的细胞器,这些细胞器会触发 DNA 双链断裂和基因组不稳定(6)。
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