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42521
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit #42521

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使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对正常小鼠大脑和 Tau KO (-/-) 小鼠大脑进行蛋白质印迹分析。Tau-KO 小鼠脑组织由布莱根妇女医院和哈佛医学院的 Dominic Walsh 博士惠赠。
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使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对经 Brefeldin A #9972(10 ng/ml,90 分钟)处理的 Hep G2 细胞和人类小脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对正常小鼠大脑和 Tau KO (-/-) 小鼠大脑进行蛋白质印迹分析。Tau-KO 小鼠脑组织由布莱根妇女医院和哈佛医学院的 Dominic Walsh 博士惠赠。
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使用 LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb(上图)和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对不同细胞系和组织的提取物进行蛋白印迹分析。
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使用 Rab5 (C8B1) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对正常小鼠大脑和 Tau KO (-/-) 小鼠大脑进行蛋白质印迹分析。Tau-KO 小鼠脑组织由布莱根妇女医院和哈佛医学院的 Dominic Walsh 博士惠赠。
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使用 Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
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一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 SORL1 (D8D4G) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对不同组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 对小鼠和大鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。使用靶向残基 Thr181 的磷酸肽或非磷酸肽进行肽封闭来验证 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 的磷酸特异性。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb(上)和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下),对已经 Brefeldin A #9972(10 ng/ml,90 分钟;+)处理和利用构建表达全长人源 ApoE2 (hApoE2; +)、ApoE3 (hApoE3; +) 或 ApoE4 (hApoE4; +) 进行空载的 (-) 或转染的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)(上图)、Tau (Tau46) Mouse mAb #4019(中图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对人皮质(泳道 1)、未经处理(泳道 2)或已经磷酸酶(泳道 3)处理的新生小鼠脑细胞及胚胎大鼠脑细胞(泳道 4)的提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)对 MEF-1 细胞(左图,LRP1 (+/+),阳性)和 PEA 13 细胞(右图,LRP1 (-/-),阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 Rab5 (C8B1) Rabbit mAb(绿色) 对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5®#4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系和组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 17
使用 Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb(绿色) 对 A549 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 18
使用 SORL1 (D8D4G) Rabbit mAb(绿色)对小鼠海马(左图)、皮质(中图)和小脑(右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb(绿色) 对 SK-MEL-28 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® 同型对照 #3900(泳道2)或 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb(泳道3),对经 Brefeldin A #9972(10 ng/ml,90分钟)处理的 Hep G2 细胞 ApoE 进行免疫沉淀法。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)(上图)、Tau (Tau46) Mouse mAb #4019(中图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对 MEF 细胞(泳道 1)和小鼠脑细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。
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在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)存在的情况下,使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb,对石蜡包埋的人阿尔茨海默病脑进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 23
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人阿尔兹海默病脑细胞进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 24
使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人小肠进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 25
使用 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)(红色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(绿色)对未经处理(左图)或已经 λ 蛋白磷酸酶(右图)处理的 Tg2576 小鼠脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 26
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的正常人正常阑尾细胞进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 27
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 28
使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肾脏进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 29
使用 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)(绿色)对小鼠原代神经元进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色假色 = Hoescht 33342 #4082(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 30
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 T-47D 细胞沉淀物(左图,阳性)和 MDA-MB-231 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 31
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑细胞进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 32
在对照物肽(左)和抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体皮肤进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 33
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 34
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 对对照(左图)或已经 λ 磷酸酶(右图)处理的石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 35
使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体脾脏进行免疫组织化学分析。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 36
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb(绿色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(红色)对小鼠纹状体(左图)、海马(中图)和纹状体(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 37
使用 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb #12885(绿色)和 S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb(红色),对小鼠脑干进行共聚焦免疫荧光分析。抗体用非磷酸化 Tau (Thr181) 肽(左图)、磷酸化 Tau (Thr181) 肽(中图)预孵育,或不用肽(右图)预孵育,以确认磷酸化特异性。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 38
使用 Tau (D1M9X) XP® Rabbit mAb(绿色),对 T-47D(阳性,左图)和 MDA-MB-231 (阴性,右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
LRP1-mediated Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit: Image 39
使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb #13366(绿色)对 Hep G2 细胞(左图,阳性)和 293T 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)进行标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
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1 个试剂盒(9 x 20 微升)

产品说明

LRP1 介导的 Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的手段,可使用抗体检测 LRP-1 介导的人 tau 的胞间传递的成分。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

LRP1 介导的 Endocytosis and Transmission of Tau Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均能检测各自靶标蛋白的内源水平。LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb 可检测总 LRP1 β 亚基的内源水平。ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 可识别过表达 ApoE2、ApoE3 和 ApoE4 蛋白。Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 仅在 Tau 蛋白在 Thr181 位点被磷酸化时方可识别 Tau 蛋白的内源水平。当 tau 蛋白在 Ser404 位点被磷酸化时,Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred) 可识别 tau 蛋白的内源水平。该抗体可检测 Ser404 单磷酸化、Ser400/Ser404 或 Thr403/Ser404 双重磷酸化以及 Ser400/Thr403/Ser404 三重磷酸化。该抗体不可检测在 Ser400 或 Thr403 位点被单磷酸化且在 Ser400/Thr403 位点被双重磷酸化的肽。Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb 可检测 Rab11 蛋白(包括同工型 Rab11a 和 Rab11b)的内源水平的。

来源/纯化

使用与人 LRP1 蛋白的 Leu4488、人 ApoE 蛋白的 Pro285、人 tau 蛋白 的 Asp430、人 SORL1 蛋白的 Glu267、人 Rab5A 蛋白的 Gly190 和人 Rab7 蛋白的 Glu188 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 Rab11 蛋白中氨基末端周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生 Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb。使用与人 Tau 蛋白 Thr181 和人 Tau 蛋白 Ser400/Thr403/Ser404 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来分别产生 Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb 和 Phospho-Tau (Ser404) (D2Z4G) Rabbit mAb (IF preferred)。

背景

Tau 是一种异源微管相关蛋白,可促进并稳定微管组装,尤其是在轴突中。除正常功能外,由 tau 的超磷酸化螺旋束组成的细胞内神经原纤维缠结蛋白聚集体是神经退行性疾病(如阿尔茨海默氏病 (AD) )的主要标志(1)。而且,疾病进展也通过经由 tau 的细胞间转移的蛋白质聚集体的逐步扩散和沉积来测量(2)。尽管对蛋白质聚集体转移的细胞间机制了解甚少,但低密度脂蛋白受体相关蛋白 1(LRP1)被认为是 tau 摄取和扩散的调节剂(3)。LRP1是 I 型跨膜受体,可介导各种配体(包括载脂蛋白和 tau)的内吞作用。有趣的是,人载脂蛋白 E (ApoE) 也与 LRP1 结合,与 AD 具有遗传相关性 (4)。除 tau 外,LRP1 介导的蛋白质摄取可能在 AD 进展中起重要作用。除 LRP1 外,其他低密度脂蛋白受体相关蛋白(包括 SORL1)也与 AD 遗传相连,这提示了保守的细胞机制会聚在该蛋白家族上,从而有助于 AD 病因(5)。一旦 tau 结合 LRP1,接收细胞很可能会通过内体途径内化并处理 tau,从而完成细胞间的传递。Rab5、Rab7 和 Rab11 是小 Rab GTP 酶的 Ras 超家族的成员,可能调节 tau 的内体处理 (6)。
  1. Johnson, G.V. and Stoothoff, W.H. (2004) J Cell Sci 117, 5721-9.
  2. Braak, H. and Braak, E. (1991) Acta Neuropathol 82, 239-59.
  3. Rauch, J.N. et al. (2020) Nature 580, 381-385.
  4. Corder, E.H. et al. (1993) Science 261, 921-3.
  5. Yin, R.H. et al. (2015) Mol Neurobiol 51, 909-18.
  6. Zhang, X. et al. (2019) ACS Chem Neurosci 10, 828-838.

通路和蛋白

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