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89985
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit
一抗
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Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit #89985

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Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对 NIH/3T3 和 3T3-L1 细胞（分化 6 天成为脂肪细胞）的提取物进行蛋白印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对未分化（左）或已分化（右）的 3T3-L1 细胞进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠褐色脂肪进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 4
使用在分化细胞中显示胞核定位的 PPARγ (C26H12A8) Rabbit mAb（红色）对 3T3-L1 进行共聚焦免疫荧光分析。用 BODIPY 493/503（绿色）标记脂肪滴。蓝色伪彩 = DRAQ5™ （DNA 荧光染料）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb，对不同细胞系和大鼠脾的提取物进行蛋白质印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经人 TNF-α #8902（30 ng/ml，1 小时）处理的 HeLa 细胞和 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。€‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了 NFkB 的已知靶标基因 NFKBIA 内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。该图显示结合遍及 FOXN3（PPARγ 的已知靶标基因） 。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 8
使用 p53 (7F5) Rabbit mAb 对 293 和 COS 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 SUMO-1 (C9H1) Rabbit mAb 对重组 GST-SUMO-1 蛋白 (38 kDa) 与 Jurkat 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 ACF1 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 11
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 NF-κB1 (D4P4D) Rabbit mAb（泳道 3），对 Raji 细胞提取物的 NF-κB1 p105/p50 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb #3677 作为二抗。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经人 TNF-α #8902（30 ng/ml，1 小时）处理的 HeLa 细胞和 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。€‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 14（上图）内的结合，包括 NFkB 的已知靶基因 NFKBIA（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。该图显示结合遍及染色体 14（上图），包括 FOXN3（ PPARγ 的已知靶标基因）（下图）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 p53 (7F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 17
在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 SUMO-1 (C9H1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 18
在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在下，使用 CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb（绿色），对 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。而 C2C12 细胞为未处理（左）或经 Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α) #5178（20 ng/ml，30 分钟；右）进行处理。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经人 TNF-α #8902（30 ng/ml，1 小时）处理的 HeLa 细胞和 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human FOXN3 Intron 3 Primers #95568、human STON2 intron 4 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 22
使用 p53 (7F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 23
使用 CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺鳞状细胞癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 24
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb（实线）对 NIH/3T3 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 25
使用 p53 (7F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HT-29（左）和 SaOs-2（右）细胞进行免疫组织化学分析。注意 p53-阴性 SaOs-2 细胞中的染色不足情况。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 26
使用 CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 27
使用 p53 (7F5) Rabbit mAb（绿色） 对 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 28
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 (30 ng/ml，1 小时）处理的 HeLa 细胞中提取的交联染色质，在加入 NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552、人 IL-8 启动子引物和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 29
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 p53 (7F5) Rabbit mAb（实线）对 HT-29 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 30
使用 CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb（绿色）对 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。
Huntingtin Interaction Antibody Sampler Kit: Image 31
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经过 UV （(100 J/m2之后 3 小时恢复）处理的 HCT116 细胞中提取的交联染色质，在加入p53 (7F5) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729后进行染色质免疫沉淀。采用 SimpleChIP® Human CDKN1A Promoter Primers #6449、human MDM2 intron 2 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时定量 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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To Purchase # 89985T
目录# 规格 价格 库存
89985T		 1 个试剂盒（6 x 20 微升）

定制制剂

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 2435 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • ChIP
 H M 53, 57 兔 IgG
CtBP1 (D2D6) Rabbit mAb 8684 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
 H M Mk 47 兔 IgG
p53 (7F5) Rabbit mAb 2527 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • F
  • ChIP
 H Mk 53 兔 IgG
SUMO-1 (C9H1) Rabbit mAb 4940 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
 H M R Mk 兔 IgG
NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb 13586 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
  • F
  • ChIP
  • C&R
 H M R 50 Active form. 120 Precursor 兔 IgG
ACF1 Antibody 6255 20 µl
  • WB
 H Mk 203 兔 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Huntingtin Interaction Antibody Sampler kit 提供了一种探测与 Huntingtin (Htt) 相互作用的转录相关蛋白的经济方法。该试剂盒含有足够的抗体，每种一抗可进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

除非另有说明，否则每个抗体都会识别总靶标蛋白的内源水平。SUMO-1 (C9H1) Rabbit mAb 可检测重组 SUMO-1 以及苏素化的蛋白内源水平（例如，90 kD 的 SUMO-1-RanGAP）。SUMO-1 (C9H1) Rabbit mAb 无法探测重组 SUMO-2 或 SUMO-3。ACF1 Antibody 可识别 ACF1 总蛋白（同工型 1 和 2）的内源水平。

来源/纯化

使用人 PPARγ 的 Asp69、人 CtBP1 蛋白的氨基末端、全长人 p53 融合蛋白、人 SUMO-1 的氨基末端周围的残基相对应的合成肽，或小鼠源 NF-kB1 P105/p50 蛋白的 Ile415 周围的残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 ACF1 蛋白 Met864 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对抗体进行纯化。

背景

过氧化物酶体增殖物激活受体 γ(PPARG) 是配体激活的核受体超家族成员，作为转录激活剂发挥作用 (1)。除了在介导脂肪生成和脂质代谢中起作用 (2)，PPAR γ 还调节胰岛素敏感性、细胞增殖和炎症 (3)。CtBP1 能够通过其内在脱氢酶活性 (4,5) 并且在发育期间通过与多梳组别 (PcG) 蛋白相互作用 (6) 调节基因活性。连同其同源物 CtBP2 一起，它充当锌指同源域因子 δEF1 的转录共阻遏蛋白，以通过反式阻抑机制调节广泛类型的细胞过程 (7)。p53 肿瘤抑制蛋白在 DNA 损伤和其他基因组畸变的细胞应答中起重要作用。p53 激活会导致细胞周期停滞以及 DNA 修复或凋亡 (8)。DNA 损伤会诱导 p53 在 Ser15 和 Ser20 位点磷酸化，导致 p53 和负调节分子（肿瘤蛋白 MDM2）之间的相互作用减弱 (9)。MDM2 通过靶向 p53 泛素化和蛋白酶体降解抑制 p53 的积聚 (10,11)。磷酸化会损坏 MDM2 结合 p53 的能力，促进 p53 在 DNA 损伤时的累积和激活 (9,12)。乙酰化对应激反应中 p53 蛋白的累积发挥积极作用 (13)。p53 通过与 SIRT1 蛋白相互作用，发生去乙酰化，而 SIRT1 蛋白是参与细胞衰老和 DNA 损伤应激的去乙酰化酶 (14)。小泛素相关修饰物 1、 2 和 3（SUMO-1, -2 和 -3）是泛素样蛋白家族的成员 (15)。SUMO-1、 -2 或 -3 （苏素化）与靶标蛋白的共价结合与泛素化类似。泛素和个别 SUMO 家族成员均靶定具有多种生物功能的不同蛋白。泛素主要调节其靶标的降解 (1)。相反，SUMO-1 接合至 RanGAP、PML、p53 和 IkB-α，以调节核运输、亚核结构的形成、转录活性的调节和蛋白质稳定性 (16-20)。核因子 kappaB (NF-kB)/Rel 家族的转录因子在炎症及免疫反应中发挥关键作用 (21, 22)。在未受刺激细胞中，NF-kB 在细胞浆中被 IkB 抑制蛋白所隔绝 (23-25)。NF-kB-激活剂可以诱发 IkB 蛋白的磷酸化，靶向这些蛋白通过泛素-蛋白酶体通路进行快速降解，并释放 NF-kB 进入调节基因表达的胞核 (26-28)。ACF1 (BAZ1A) 在发育 (29)、染色质结构调节 (30)和 DNA 损伤反应中有明显作用 (31, 32)。不同发育阶段指导果蝇中 ACF1 的表达，并且果蝇发育期间 ACF1 表达改变导致脱离正常染色质组织 (29)。
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通路与蛋白质

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