反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 70-80 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 HHLA2/B7-H7 蛋白中 Asn101 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
HERV-H LTR 结合蛋白 2(HHLA2,别名为 B7-H5 和 B7-H7)是 B7 免疫球蛋白超家族的一员 (1)。HHLA2 蛋白在人单核细胞表面呈结构性表达,B 细胞用 LPS 和 IFN-γ 刺激也会诱导这种蛋白的表达 (1,2)。通过与 TMIGD2 发生相互作用(TMIGD2 在所有初始 T 细胞和大部分自然杀伤细胞上呈结构性表达,但不在 T 调节性细胞或 B 细胞上表达),HHLA2 会在 TCR 介导的激活下共刺激 T 细胞,从而以一种依赖于 AKT 的信号转导级联促进 T 细胞增殖和细胞因子的产生 (2)。与此相反,HHLA2 经证实还能抑制 T 细胞增殖和细胞因子的产生,表明 HHLA2 辅助受体在具有共抑制功能的激活 T 细胞上表达 (3)。此外,HHLA2 经证实在各种癌细胞中高表达,而且与不良预后有关 (4-10)。进一步了解 HHLA2 通路的免疫功能,可指导人们选择用于癌症免疫疗法、自身免疫性疾病、感染和移植排斥的药剂。
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