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8335
Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit #8335

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Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 1

使用 AceCS1 (D19C6) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 2

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb(绿色)对仅营养剥夺(左上)、经血清处理(10 %,30 分钟;右上)、经 H2O2 处理(10 mM,10 分钟;左下)或经 λ 磷酸酶处理(2 小时;右下)的 293 细胞(所有细胞均在 Krebs-Ringer 碳酸氢盐缓冲液中营养剥夺 4 小时)进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 3

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 SK-BR-3 细胞(蓝色)和 HT-29 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 4

使用 ATP-Citrate Lyase Antibody 对 HeLa、NIH/3T3、C6 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 5

使用 Phospho-ATP-Citrate Lyase (Ser455) Antibody(上图)或 ATP-Citrate Lyase Antibody #4332(下图)对未经或经 PDGF 处理的指定时间的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 6

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5™(DNA 荧光染料)。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 7

使用 Lipin 1 (D2W9G) Rabbit mAb(红色)对 3T3-L1 脂肪细胞(分化,7天)进行共聚焦免疫荧光分析。用 BODIPY® 493/503(绿色)标记脂肪滴。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 8

使用 ACSL1 (D2H5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 10

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 11

对用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb(红色)标记的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = Draq5™(DNA 荧光染料)。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 12

使用 Lipin 1 (D2W9G) Rabbit mAb(上)和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下)对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 13

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肝脏细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 14

在对照肽(左)或 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Blocking Peptide #1062(右)存在的情况下,使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 15

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 16

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb 对未经(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 17

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 18

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的肝细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 19

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb 对未经(左)或经苯乙双胍处理(右)的石蜡包埋的 NCI-H2228 细胞团进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 20

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 21

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 22

使用 Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb(上)或 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb #3676(下)对未经或经寡霉素 #9996 处理(0.5 μM,30 分钟)的 SH-SY5Y 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。磷酸化抗体的特异性可通过 λ 磷酸酶处理进行验证。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 23

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肝细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 24

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对显示脂肪细胞染色的石蜡包埋的淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 25

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 26

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠褐色脂肪进行免疫组织化学分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 27

对 HeLa 细胞提取物的乙酰辅酶 A 羧化酶进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,并且泳道3是 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb。使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 28

使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit: Image 29

使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对不同细胞系细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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8335T
1 个试剂盒(8 x 20 µl)

产品说明

Fatty Acid and Lipid Metabolism Antibody Sampler Kit 提供一种经济有效的方法用来评估包含脂肪酸和脂类代谢的关键蛋白。该试剂盒包含足量的一抗,每种一抗可进行两次免疫印迹实验。

MW (kDa) 不适用

特异性/敏感性

AceCS1 (D19C6) Rabbit mAb 可检测总细胞质乙酰辅酶 A 合成酶的内源水平。仅当在 Ser79 位点被磷酸化时,Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) (D7D11) Rabbit mAb 可检测的 ACC 的内源水平;该抗体可检测 ACCα 和 ACCß。Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 可识别乙酰辅酶 A 羧化酶蛋白的所有同工型的内源水平。仅当在 Ser455 位点被磷酸化时,Phospho-ATP-Citrate Lyase (Ser455) Antibody 可检测 ATP-柠檬酸裂解酶的内源水平。ACSL1 (D2H5) Rabbit mAb、ATP-Citrate Lyase Antibody、Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 和 Lipin 1 (D2W9G) Rabbit mAb 可检测其各自靶蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人胞质乙酰辅酶 A 合成酶序列、人乙酰辅酶 A 羧化酶 α1 Ser523 周围的残基、人脂肪酸合成酶 Gly46 周围的残基、人脂质 1 羧基末端周围的残基或人 ACSL1 蛋白 Ala257 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人乙酰辅酶 A 羧化酶蛋白 Ser79 周围的残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生激活状态的单克隆抗体。使用与人 ATP-柠檬酸裂解酶蛋白 Ser455 周围的残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生修饰状态特异性多克隆抗体。使用与人 ATP-柠檬酸裂解酶蛋白的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

脂肪酸和脂类代谢过程对细胞营养和能量维持十分关键。细胞质乙酰辅酶 A 合成酶 (AceCS1) 催化乙酸和辅酶 A 转化成乙酰辅酶 A。通过 AceCS1 合成的乙酰辅酶 A 用于脂肪酸和脂质合成 (1,2)。乙酰辅酶 A 羧化酶 (ACC) 可催化脂肪酸合成通路的关键步骤。AMPK 在 Ser79 位点的磷酸化或 PKA 在 Ser1200 位点的磷酸化会抑制 ACC 的酶活性 (3)。哺乳动物长链酰基辅酶 A 合成酶 (ACSL) 通过两个步骤的反应,催化脂肪酸结合辅酶 A,进而形成脂肪酰基辅酶 A (4)。ATP-柠檬酸裂解酶 (ACL) 是一个同源四聚体蛋白,负责在胞液中催化生成乙酰辅酶 A 和草酰乙酸 (OAA),这对脂肪酸、胆固醇和乙醇胆碱及葡萄糖生物合成起关键作用(5)。ACL 在 Ser455 位点的磷酸化会解除柠檬酸的正合别构调节,并增强该酶的催化活性 (6)。脂肪酸合成酶 (FASN) 催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 合成长链脂肪酸 (7)。Lipin 1 在多种组织和细胞(如肝脏,肌肉,脂肪和神经细胞系)的脂质代谢均发挥作用 (8-10)。它在分子层面具有双重作用,Lipin 1 是肝脏中的一种转录共激活因子,同时也是甘油三酯和磷脂生物合成通路中的一种磷脂磷酸酶 (11)。

  1. Ikeda, Y. et al. (2001) J Biol Chem 276, 34259-69.
  2. Luong, A. et al. (2000) J Biol Chem 275, 26458-66.
  3. Ha, J. et al. (1994) J Biol Chem 269, 22162-8.
  4. Mashek, D.G. et al. (2004) J Lipid Res 45, 1958-61.
  5. Towle, H.C. et al. (1997) Annu Rev Nutr 17, 405-33.
  6. Potapova, I.A. et al. (2000) Biochemistry 39, 1169-79.
  7. Katsurada, A. et al. (1990) Eur J Biochem 190, 427-33.
  8. Finck, B.N. et al. (2006) Cell Metab 4, 199-210.
  9. Phan, J. and Reue, K. (2005) Cell Metab 1, 73-83.
  10. Verheijen, M.H. et al. (2003) Genes Dev 17, 2450-64.
  11. Reue, K. and Zhang, P. (2008) FEBS Lett 582, 90-6.

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