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49398
Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit
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Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit #49398

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使用 Claudin-1 (D3H7C) Rabbit mAb（绿色）对 IGROV-1（阳性，左）、A549（阳性，中）和 293（阴性，右）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 2

使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对固定和通透的HeLa 细胞（蓝色，阴性）和 MCF7 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞术分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 3

使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠细胞进行免疫组织化学分析。注意肠肌丛的染色。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 4

使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb（绿色）对 A172（阳性，左图）和 MCF7（阴性，右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 5

使用 Slug (C19G7) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对 PANC-1 细胞（蓝色）和 A204 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 6

使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）对 E11.5 小鼠胚胎进行共聚焦免疫荧光平铺扫描。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #（红色）进行标记。样品用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封装。插图 A-D 在后续图中以高分辨率显示。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 7

使用 Vimentin (D21H3) Rabbit mAb（绿色）对 SNB19 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 8

使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 MCF7 细胞（蓝色）和 HeLa 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 9

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 HCC1806 细胞（蓝色，阴性）和 HT-1080 细胞（绿色，阳性）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 10

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的人卵巢浆液性癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 11

使用 ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb（绿色）对 MCF7（高表达，左图）和 MDA-MB-435（低表达，右图）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #（红色）进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 12

使用 Claudin-1 (D3H7C) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对 IGROV-1、A549 和 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 13

使用与同型对照物作对比的 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb（绿色，左图）对照（右图），对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光图像分析。蓝色伪彩 = DRAQ5®（DNA 荧光染料）。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 14

使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 15

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤细胞进行的免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 16

使用 Slug (C19G7) Rabbit mAb（绿色）对 A204 细胞（左）和 PANC-1 细胞（右）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DY554 phalloidin（红色）标记。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 17

插图 A：使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）、DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）和 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）染色的 E11.5 小鼠胚胎。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 18

使用与 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（红色）和 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb（蓝色），对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 19

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb（绿色），Cytochrome C (6H2.B4) Mouse mAb #12963 （黄色）和 Alexa Fluor®647 Phalloidin #8940 （红色）对 HT-1080 细胞（左，阳性）和 HCC1806 细胞（右，阴性）进行的共聚焦免疫荧光分析。玻片用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封装。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 20

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 21

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb（泳道 3）对 MCF7 细胞提取物 ZO-1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 22

使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 A172（阳性，左图）和 MCF7（阴性，右图）细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 23

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类卵巢粒层细胞瘤进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 24

使用 Slug (C19G7) Rabbit mAb 对 A204、SKMEL5 和 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 25

插图 B：使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）、DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）和 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）染色的 E11.5 小鼠胚胎。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 26

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 27

使用 ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 28

使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 29

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胃癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 30

插图 C：使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）、DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）和 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）染色的 E11.5 小鼠胚胎。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 31

使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 32

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体子宫内膜样腺癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 33

使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴结转移性腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 34

插图 D：使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）、DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）和 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）染色的 E11.5 小鼠胚胎。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 35

在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 36

以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（右图）作为对照，使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb（左图）对石蜡包埋的人胃肠间质瘤进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 37

使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 38

使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated) 对 E14.5 胚胎进行共聚焦免疫荧光平铺扫描。横向切片在 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）中装片前用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）和 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）进行标记。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 39

使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 40

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 41

在对照肽（左图）或 E-Cadherin Blocking Peptide #1050（右图）存在的情况下，使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 42

使用 TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated)（绿色）对 SH-SY5Y 细胞（左图，阳性）和 HeLa 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #（红色）进行标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 43

使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mA 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 44

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 4T1 同源乳腺肿瘤细胞进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 45

使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 46

使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 A172 和 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 47

使用 Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb #5741（上图）或 β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970（下图）对对照的 HeLa 细胞（泳道 1）或波形蛋白敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白印迹分析。波形蛋白敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对波形蛋白的特异性。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 48

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HT-1080 细胞沉淀物（左图，阳性）或 HCC1806 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 49

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 50

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人粘液表皮样癌进行免疫组织化学分析。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 51

对 Jurkat 细胞提取物 ZEB1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb。使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit: Image 52

使用 ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb（上）或 GAPDH (D16H11) XP®Rabbit mAb#5174（下），对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。

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产品说明

Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) IF Antibody Sampler Kit 提供一种经济的方法来评估通过免疫荧光法（IF）建立的 EMT 标记的表达。

特异性/敏感性

Claudin-1 (D3H7C) Rabbit mAb 可检测 claudin-1 总蛋白的内源水平。在 claudin-1-阳性和 claudin-1-阴性细胞系中，该抗体可与一条未知来源的条带发生交叉反应，这条带通过 SDS-PAGE 电泳以大约 120 kDa 的速度移动。荧光免疫染色未检测到这种非特异性信号。E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 可检测 E-cadherin 总蛋白的内源水平。该抗体不与相关家族成员发生交叉反应，例如 N-cadherin。N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 可检测 N-cadherin 总蛋白的内源水平。已经在小鼠肾脏组织中观察到一些非特异性染色。Slug (C19G7) Rabbit mAb 可检测 Slug 总蛋白的内源水平。TWIST1 (E7E2G) Rabbit mAb (IF Formulated) 可检测 TWIST1 总蛋白的内源水平。Vimentin (D21H3) XP® Rabbit mAb 可检测内源水平的总波形蛋白。ZEB1 (E2G6Y) XP® Rabbit mAb 可识别 ZEB1 总蛋白的内源水平。ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb 可检测 ZO-1 总蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 claudin-1 蛋白的 Pro194、人 E-cadherin 蛋白的 Pro780、人 N-cadherin 蛋白的 Arg526、人 TWIST1 蛋白的 Pro24、人 vimentin 蛋白的 Arg45 或人 ZO-1 蛋白的 Ala1558 的周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 Slug 蛋白或 ZEB1 蛋白中央区域的残基相对应的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

上皮-间质细胞转换 (EMT) 是发育期间的重要过程，在此过程中上皮细胞获得间质成纤维细胞样特性，表现出胞内黏附减少和运动性增加。这是正常胚胎发育的关键特征，恶性上皮细胞肿瘤会利用此特征进行肿瘤扩散 (1-3)。这一严格调控的过程与大量细胞和分子活动相关。EMT 依赖于细胞黏附分子表达的减少。钙粘蛋白介导钙依赖性细胞间黏附，并在正常组织发育中起关键作用 (4)。E-钙粘蛋白被认为是许多上皮癌细胞侵袭和生长的活性抑制蛋白 (4-6)。近期研究表明，除了 E-上皮钙粘素丢失，癌细胞的 N-上皮钙粘素表达上调。钙粘蛋白表达变化称为“钙粘蛋白转换”，E-钙粘蛋白表达下调是 EMT 的一个标志 (1)。紧密连接或紧密闭合蛋白可在上皮细胞和内皮细胞之间形成一个连续的液体屏障。紧密连接可调节细胞旁通透性并维持细胞极性，阻断顶端和基底外侧细胞表面之间跨膜蛋白的运动。紧密连接由密封蛋白和闭合蛋白组成，并可与细胞骨架连接 (7,8)。封闭区（ZO）蛋白（例如 ZO-1）是外周膜接头蛋白，可将闭合蛋白和密封蛋白等连接跨膜蛋白结合到肌动蛋白细胞骨架 (9)。ZO 蛋白对紧密连接形成和功能不可或缺 (10,11)；ZO-1 和密封蛋白突变会诱导 EMT (12)。波形蛋白是间叶细胞的中间纤维，见于早期发育阶段。在胞外刺激下，波形蛋白的动态结构会发生变化和空间重组，有助于协调不同的信号转导通路 (13)。Slug (SNAI2) 是一种广泛表达的转录阻遏蛋白，也是锌指转录因子 Snail 家族的一员 (14,15)。与相关 Snail 蛋白一样，Slug 结合 E-钙粘蛋白启动子区来抑制发育期间的转录(16)。Slug 结合整合素启动子序列后，会抑制整合素表达、导致细胞黏附减少 (17)。ZEB家族蛋白（例如ZEB1）是含有锌指和同源盒结构域的转录因子，其调控靶标包括 E-cadherin（1）。Twist1 是碱性螺旋-环-螺旋 (b-HLH) 转录因子，是胚胎形态发生的一个主调节因子，且在间充质分化中起着至关重要的作用 (18,19)。TWIST 在多种人类肿瘤中上调，并被认为是 EMT 和转移的驱动因素（20-21）。

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通路和蛋白

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