反应性 | H |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 90 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Cyclin F (D9K2U) Rabbit mAb 可识别 Cyclin F 总蛋白的内源水平。该抗体可通过蛋白质印迹法识别出 80 kDa 的未知蛋白。
人
使用与人 Cyclin F 蛋白 Pro665 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Cyclin F 是 F-box 蛋白家族的基础成员,存在于所有真核细胞中。F-box 蛋白是 Skp1-Cullin-F-box (SCF) 泛素连接酶复合体的组分。SCF 复合体的底物特异性由可替换的 F-box 蛋白决定,该蛋白通过与磷酸化底物蛋白结合并将其募集到 SCF 中心发挥接头蛋白的作用 (1)。
除了一个 F-box 结构域,cyclin F 还包含一个 cyclin 蛋白盒结构域,但无法调节周期素依赖性激酶的活性。Cyclin F 的表达在细胞周期中上下浮动,在 G2 期达到顶峰 (2)。
Cyclin F 与中心体蛋白 CP110 发生相互作用,后者在中心粒复制和纺锤体形成中发挥重要作用。CP110 在 G2 期通过 cyclin F 介导实现降解,是细胞正常进入有丝分裂所需的 (3)。对引发 DNA 双链断裂的电离辐射作出应答,cyclin F 与 B-Myb 发生相互作用,防止发生 B-Myb 的 cyclin A 依赖型磷酸化和延迟进入有丝分裂期。这个 G2 期停滞使细胞能够对 DNA 损伤诱发的 G2/M 期检查点作出反应 (4)。Cyclin F 也能够控制核苷酸还原酶 M2 亚基 RRM2 的稳定性,而 RRM2 能够维持细胞中用于 DNA 合成与修复的 dNTP 水平,对基因毒性应激作出应答 (5)。研究人员指出,cyclin F 是肝细胞癌 (HCC) 的一个预后标记物 (6)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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