反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 90 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 Cyclin F 蛋白 Pro665 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Cyclin F 是 F-box 蛋白家族的基础成员,存在于所有真核细胞中。F-box 蛋白是 Skp1-Cullin-F-box (SCF) 泛素连接酶复合体的组分。SCF 复合体的底物特异性由可替换的 F-box 蛋白决定,该蛋白通过与磷酸化底物蛋白结合并将其募集到 SCF 中心发挥接头蛋白的作用 (1)。
除了一个 F-box 结构域,cyclin F 还包含一个 cyclin 蛋白盒结构域,但无法调节周期素依赖性激酶的活性。Cyclin F 的表达在细胞周期中上下浮动,在 G2 期达到顶峰 (2)。
Cyclin F 与中心体蛋白 CP110 发生相互作用,后者在中心粒复制和纺锤体形成中发挥重要作用。CP110 在 G2 期通过 cyclin F 介导实现降解,是细胞正常进入有丝分裂所需的 (3)。对引发 DNA 双链断裂的电离辐射作出应答,cyclin F 与 B-Myb 发生相互作用,防止发生 B-Myb 的 cyclin A 依赖型磷酸化和延迟进入有丝分裂期。这个 G2 期停滞使细胞能够对 DNA 损伤诱发的 G2/M 期检查点作出反应 (4)。Cyclin F 也能够控制核苷酸还原酶 M2 亚基 RRM2 的稳定性,而 RRM2 能够维持细胞中用于 DNA 合成与修复的 dNTP 水平,对基因毒性应激作出应答 (5)。研究人员指出,cyclin F 是肝细胞癌 (HCC) 的一个预后标记物 (6)。
除非如以 CST 合法授权代表签署的书面形式另行明确同意,否则以下条款适用于 CST、其附属公司或其分销商提供的产品。除非 CST 合法授权代表以书面形式单独接受,否则任何附加于或异于此处所载条款和条件的客户条款和条件均被拒绝且无效。
产品用“仅供研究使用”或类似标示声明标示,并且尚未经 FDA 或其他国外或国内监管实体出于任何目的批准、准许或许可。客户不得出于任何诊断或治疗目的或以任何与产品标示声明相冲突的方式使用任何产品。CST 销售或许可的产品提供给作为最终用户的客户,且仅用于研究和开发用途。出于诊断、预防或治疗目的任何产品使用或出于转售(单独或作为成分)或其他商业目的的任何产品购买都要求来自 CST 的单独许可。客户 (a) 不得向任何第三方出售、许可、出借、捐赠或另行转让或提供任何本公司产品,无论单独或联合其他材料方式,或使用本公司产品制造任何商业产品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反编译、反汇编或另行尝试发现本公司产品的底层结构或技术,或出于开发与 CST 产品或服务竞争的任何产品或服务的目的使用本公司产品,(c) 不得从本公司产品改变或移除任何商标、商品名称、徽标、专利或版权声明或标记,(d) 仅应根据 CST 产品销售条款和任何适用文档使用本公司产品,以及 (e) 应就客户联系本公司产品所用的任何第三方产品或服务而言遵守任何许可、服务条款或类似协议。