反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 187 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
在 10 mM HEPES 钠 (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中供应。-20℃ 保存。切勿分装抗体。
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 C3 蛋白的 Ala1370 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
补体是血液和其他体液中分泌的可溶性蛋白质的集合(1)。作为先天免疫系统的一部分,补体蛋白在称为调理作用的过程中参与病原体和受损细胞的清除,这导致病原体被抗体和/或补体蛋白包被,以促进碎片或外来病原体的吞噬作用。补体通过一连串的裂解反应激活,最初由模式识别受体介导的病原体/碎片检测触发。裂解介导的产物的级联激活了三种不同的效应子途径,包括炎症、吞噬作用和膜攻击,这代表了对宿主生物体的协同防御。在哺乳动物基因组中编码了几种补体蛋白,依次用大写字母“ C”和数字表示,依次发现它们。通过激活 C3 转化酶,许多补体级联反应会汇聚在 C3 基因编码的 C3 上。C3 基因产生 C3 多肽蛋白,该蛋白由通过二硫键连接的 α 亚基和 β 亚基组成。C3 转化酶的激活可裂解 C3α 亚基以产生 C3a,其作为过敏毒素来介导局部炎症反应。除了 C3a,C3 转化酶介导的 C3 裂解还产生 C3b。C3b 具有多种功能,是补体系统的主要效应分子。C3b 结合到微生物表面,以便通过携带 C3 受体的吞噬细胞进行吞噬。C3b 也可以通过血清蛋白酶进一步处理以生成其他生物活性片段。 最后,C3b 可以与其他补体片段形成复合物,从而引发补体家族成员(如 C5)的裂解,从而引发其他先天免疫应答。 除了先天的免疫反应,补体系统的几个组成部分(包括 C3)也与大脑发育以及神经发育和神经退行性疾病有关。在发育过程中,补体系统在小胶质依赖性突触剪除多余突触中起作用,特别是在视觉系统中(2)。另外,补体介导的突触修剪也可能导致神经退行性疾病,例如阿尔茨海默氏病 (3,4)。
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