反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 18 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
流式细胞术(活性) | 1:200 - 1:800 |
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:263
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
注:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活力指示染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品网页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经验证用于流式细胞术的细胞染料完整列表。
注:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。
注:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。
注:人 Fc 受体与兔 IgG 发生交叉反应。当感兴趣的细胞表达高水平的 Fc 受体蛋白(例如,巨噬细胞/单核细胞谱系)时,在用兔抗体进行免疫染色之前,用人 Fc 块预孵育活细胞。
注:最佳离心条件会根据细胞类型和试剂容量变动。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀下来。
修订时间 2022 年 1 月
实验步骤编号:1865
人
使用与人 CD59 蛋白中 Leu79 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CD59 是 GPI 锚定的膜蛋白,该蛋白质作为补体攻膜复合体 (MAC) 的抑制剂发挥作用。CD59 与补体组分 C8 和 C9 结合,阻止 C9 聚合和插入膜中,从而抑制补体依赖的细胞裂解 (CDC) (1)。CD59 是普遍表达的保护细胞免遭 CDC 的细胞膜蛋白。已经报道罕见的 CD59 缺乏情况在人患者中造成阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (2,3)。CD59 在肿瘤细胞和病毒感染的细胞上的表达使其抵抗抗体依赖的补体介导溶胞作用。已经积极追寻 CD59 强力抑制剂活跃供治疗性应用 (4,5)。此外,CD59 可以通过调节胞吐而调节胰岛素分泌 (6)。
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