对促销感兴趣? | 点击此处 >>
39037
CD44 (IM7) Rat mAb
一抗
单克隆抗体

CD44 (IM7) Rat mAb #39037

引用 (1)
筛选器:
  1. IF
Immunofluorescence Image 1: CD44 (IM7) Rat mAb
使用 CD44 (IM7) Rat mAb(绿色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(红色)对野生型小鼠脑(左图)或 5XFAD 阿尔茨海默病小鼠模型脑(右图)细胞进行共聚焦免疫荧光平铺扫描。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。插图 A 和 B 在后续图中的分辨率更高。
Immunofluorescence Image 2: CD44 (IM7) Rat mAb
插图 A:使用 CD44 (IM7) Rat mAb(绿色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(红色)的野生型小鼠脑(左图)或 5XFAD 阿尔茨海默病小鼠模型脑(右图)细胞。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
Immunofluorescence Image 3: CD44 (IM7) Rat mAb
插图 B:使用 CD44 (IM7) Rat mAb(绿色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(红色)的野生型小鼠脑(左图)或 5XFAD 阿尔茨海默病小鼠模型脑(右图)细胞。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
Immunofluorescence Image 1: CD44 (IM7) Rat mAb
使用 CD44 (IM7) Rat mAb(绿色)对 C2C12 细胞(左图,阳性)或 Neuro-2a 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)进行标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
To Purchase # 39037S
产品货号 规格 价格 库存
39037S
100 µl

支持数据

反应性 M
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 大鼠 IgG2b、kappa

应用缩写:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Vir- Virus
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

应用 稀释度
免疫荧光法(冰冻) 1:50 - 1:200
免疫荧光法(免疫细胞化学) 1:50 - 1:200

保存

保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。不要分装抗体

实验步骤

打印

查看 > 折叠 >

免疫荧光法(冰冻)

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS): (9808) 要制备 1L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛:16%,无甲醇,Polysciences 公司生产。(cat# 18814),使用新鲜制剂,小瓶打开后在 4°C 避光保存,同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭缓冲液:(1X PBS / 5% 常规血清/ 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 0.5 ml 与二抗同一物种来源的正常血清(例如 Normal Goat Serum (#5425) 添加至 9.5 ml 1X PBS)并充分混合。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液: (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后,添加 0.1 g BSA (#9998),并混合。
  5. 建议的荧光染料标记抗大鼠二抗:

  6. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071),Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 样品制备 - 冰冻/恒冷箱切片 (IF-F)

  1. 冰冻固定组织进行免疫染色(C 部分)。
  2. 对新鲜未固定的冰冻组织,请立刻按下列步骤固定:
    1. 切片用 1X PBS 中稀释的 4% 甲醛浸没。

      注意:甲醛有毒性,仅可在通风橱中使用。

    2. 室温下固定切片 15 分钟。
    3. 吸干液体后用 1X PBS 冲洗三次,每次 5 分钟。
    4. 继续进行免疫染色操作(C 部分)。

C. 免疫染色

注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭标本时,按照产品网页实验步骤中推荐的稀释比例,在抗体稀释缓冲液中配制一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  6. 用抗体稀释缓冲液将荧光物质标记的二抗稀释后,室温下避光孵育标本 1–2 小时。
  7. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  8. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ,用盖玻片盖住切片。
  9. 要达到最佳效果,使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。

发布​于 2006 年 11 月 

修订于 2016 年 7 月

实验步骤编号:152

免疫荧光法(免疫细胞化学)

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS): (9808) 要制备 1L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛:16%,无甲醇,Polysciences 公司生产。(cat# 18814),使用新鲜制剂,小瓶打开后在 4°C 避光保存,同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭缓冲液(1X PBS / 5% 正常血清 / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,将 0.5 ml 与二抗同一物种来源的正常血清(如 Normal Goat Serum (#5425)添加至 9 ml 1X PBS) 并充分混匀。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液 (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,将 30 µl Triton™ X-100 添加至 10 ml 1X PBS 。充分混合后,添加 0.1 g BSA (9998),并混合。
  5. 建议的荧光染料标记抗大鼠二抗:

  6. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071),Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 标本制备 - 培养细胞系 (IF-IC)

注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。

  1. 吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。

    注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。

  2. 室温下固定细胞 15 分钟。
  3. 吸干固定液,用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  4. 继续进行免疫染色操作(C 部分)。

C. 免疫染色

注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭时,按产品网页中列出的抗体稀释缓冲液中稀释来制备一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  6. 用抗体稀释缓冲液将荧光物质标记的二抗稀释后,室温下避光孵育标本 1–2 小时。
  7. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  8. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ,用盖玻片盖住切片。
  9. 要达到最佳效果,使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。

发布​于 2006 年 11 月 

修订于 2013 年 11 月

实验步骤编号:149

特异性/敏感性

CD44 (IM7) Rat mAb 可检测 CD44 总蛋白的内源水平。该抗体可检测细胞外结构域内的表位,并且预计可检测所有 CD44 同工型。除小鼠反应性外,流式细胞分析显示该克隆还对人样品呈阳性。

物种反应性:

小鼠

来源/纯化

对组织培养上清液进行亲和层析纯化即可获得该单克隆抗体。

背景

CD44 是 I 型跨膜糖蛋白,可通过对透明质酸 (HA) 的亲和力并可能通过胞外基质 (ECM) 的其他部分,介导细胞-细胞相互作用和细胞-基质相互作用。CD44 呈高度多态性,具有多种选择性剪切变体, 经受广泛的翻译后修饰 (1,2)。CD44 的表面水平增加是 T 细胞激活的特征,并且该蛋白质的表达在炎症反应期间上调。研究已经证实, CD44 和 HER2 之间的相互作用与卵巢癌细胞生长的增长相关 (1-3)。CD44 与埃兹蛋白、根蛋白和膜突蛋白 (ERM) 相互作用,使肌动蛋白细胞骨架与质膜和 ECM 连接 (4-6)。在静息细胞中,CD44 在 Ser325 处组成型磷酸化。PKC 的激活导致 Ser291 的磷酸化、Ser325 的去磷酸化、埃兹蛋白从 CD44 解离和定向运动性 (4)。
  1. Goodison, S. et al. (1999) Mol. Pathol. 52, 189-196.
  2. Cichy, J. and Puré, E. (2003) J. Cell Biol. 161, 839-843.
  3. Bourguignon, L.Y. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 27913-27918.
  4. Legg, J.W. et al. (2002) Nat. Cell Biol. 4, 399-407.
  5. Yonemura, S. et al. (1998) J. Cell Biol. 140, 885-895.
  6. Tsukita, S. et al. (1994) J. Cell Biol. 126, 391-401.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
DyLight 是 Thermo Fisher Scientific, Inc. 及其子公司的注册商标。
ProLong 是 Life Technologies 公司的注册商标。
Powered by Translations.com GlobalLink OneLink SoftwarePowered By OneLink