反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | |
来源/同种型 | 小鼠 IgG1、kappa |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
IHC Leica BOND | 1:50 |
免疫组织化学(石蜡) | 1:50 |
注:请参阅产品数据表或产品网页,了解合适的抗体稀释度^。
步骤 | 试剂 | 时间/温度 | |
---|---|---|---|
1 | 脱蜡 | BOND™ Dewax Solution、100% 乙醇、BOND™ Wash Solution | 预编程的 Leica® BOND™ |
2 | 抗原修复 | BOND™ Epitope Retrieval ER2 Solution | 20 分钟,100˚C | 实验步骤:用 ER2 进行 HIER 20 分钟 |
3 | 过氧化物封闭液 | Refine Detection Kit Peroxide Block* | 5 分钟 |
洗涤 | BOND™ Wash Solution | 3x 0:00 分钟 | |
4 | 蛋白封闭液(可选) | #5425 NGS 或 #15019 Animal-Free Blocking Solution | 20 分钟 |
5 | 一抗^ | 用 #8112 SignalStain® Antibody Diluent 稀释 | 60 分钟 |
洗涤 | BOND™ Wash Solution | 3x 2:00 分钟 | |
6 | Post Primary Mouse Linker | Refine Detection Kit Post Primary* | 10 分钟 |
洗涤 | BOND™ Wash Solution | 3x 2:00 分钟 | |
7 | 二次检测 | Refine Detection Kit Polymer* | 10 分钟 |
洗涤 | BOND™ Wash Solution/Deionized Water | 定制(参见下文) | |
8a | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 0:00 分钟 |
8b | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 10 分钟 |
洗涤 | 去离子水 | 3x 0:00 分钟 | |
9 | 复染 | Refine Detection Kit Hematoxylin* | 5 分钟 |
洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
洗涤 | BOND™ Wash Solution | 0:00 分钟 | |
洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
10 | 脱水(离线): | ||
在 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 秒。 | |||
在 100% 乙醇中重复孵育 2 次,每次 10 秒。 | |||
在二甲苯中重复孵育 2 次,每次 10 秒。 | |||
11 | 用盖玻片和 #14177 SignalStain® Mounting Medium 封片。 | ||
可选订制洗涤: | BOND™ Wash Solution | 2:00 | |
BOND™ Wash Solution | 分配器类型:打开 0:00 | ||
BOND™ Wash Solution | 2:00 | ||
BOND™ Wash Solution | 分配器类型:打开 0:00 | ||
BOND™ Wash Solution | 0:00 | ||
去离子水 | 0:00 |
*BOND™ Polymer Refine Detection Kit(货号:DS9800)中所含的试剂
LEICA® 是 Leica Microsystems IR GmbH 的注册商标。
BOND™ 是 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 的商标。CST 和 Leica Microsystems IR GmbH 或 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 之间没有附属或赞助关系。
发布时间 2018 年 8 月
修订时间 2018 年 9 月
实验步骤编号:1484
注意:使用反渗透去离子 (RODI) 水或同等级别的水制备溶液。
注意:在制作过程中务必随时保持切片处于湿润状态。
对于 EDTA:将切片浸入 1X EDTA 修复液中,再放入微波炉中加热直到沸腾;继续保持 15分钟的亚沸腾温度 (95°-98°C)。无需冷却。
推荐的 检测试剂 |
SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Mouse) #8125 | SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (AP, Mouse) #31926 |
---|---|---|
兼容的 色原 |
SignalStain® DAB Substrate Kit #8059 | SignalStain® Vibrant Red Alkaline Phosphatase Substrate Kit #76713 |
SignalStain® Vivid Purple Peroxidase Substrate Kit #96632 | SignalStain® Ultra Blue Alkaline Phosphatase Substrate Kit #12824 | |
SignalStain® Deep Black Peroxidase Substrate Kit #72986 | ||
SignalStain® Radiant Yellow Peroxidase Substrate Kit #69644 |
注意:使用非本实验步骤中指定的检测试剂可能需要进一步优化一抗,以考虑检测试剂的不同灵敏度。
发布时间 2015 年 2 月
修订时间 2020 年 4 月
实验步骤编号:1990
人
使用与人 CD1A 蛋白中氨基末端区域周围的残基相对应的重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CD1A 是一种 1 型细胞表面跨膜糖蛋白,其结构类似于 MHC 1 类,与 β2-微球蛋白相关表达 (1)。CD1A 是 CD1 家族的成员,并且已显示介导初级脂质和糖脂抗原呈递给 T 细胞淋巴细胞以进行识别 (1,2)。它由朗格汉斯细胞、皮质双阳性和单阳性胸腺细胞以及指状树突细胞表达 (1)。CD1A 已被证明可以识别 T 细胞发育 (3)。
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