反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 48, 65 |
来源/同种型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用对人 CD177 蛋白的氨基末端具有特异性的重组蛋白,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
分化抗原簇 177 抗原(CD177,也称为人中性粒细胞同种异体抗原 2a 和 NB1),是一种糖基化磷脂酰肌醇 (GPI) 偶联 N-糖基化跨膜蛋白,主要在中性粒细胞表面表达 (1,2)。CD177 表达可由粒细胞集落刺激因子引起,并可在妊娠期间或细菌感染期间被诱发 (3-5)。CD177 通过与 CD31/PECAM-1 和整合素 β2 在内皮细胞上的相互作用介导中性粒细胞的黏附性和跨内皮迁移 (6,7)。CD177 还促进蛋白酶 3 (PR3) 在细胞表面的表达,可在中性粒细胞血细胞渗出期间起到增强内皮细胞的连接完整性,从而增强血管的完整性的作用 (8-10)。与 CD11b/ITGAM、整合素 β2 和 PR3 结合,CD177 促进了 TNF-α 诱导中性粒细胞的激活,包括脱粒和超氧化物产生 (11)。CD177是一种多态性基因,与多种重要临床疾病相关,包括真性红细胞增多症、Wegener 肉芽肿和免疫介导的新生儿中性粒细胞减少症 (12-14)。
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