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46512
CD11b/ITGAM (M1/70) Rat mAb
一抗
单克隆抗体

CD11b/ITGAM (M1/70) Rat mAb #46512

引用 (4)
筛选器:
  1. IF
Immunofluorescence Image 1: CD11b/ITGAM (M1/70) Rat mAb
使用 CD11B/ITGAM (M1/70) Rat Mab(绿色)对小鼠脑小胶质细胞(左图)或肝脏外周巨噬细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。切片用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封装。
Immunofluorescence Image 2: CD11b/ITGAM (M1/70) Rat mAb
使用 CD11b/ITGAM (M1/70) Rat mAb(绿色)和 β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb #8243(红色)对阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型的大脑进行共聚焦免疫荧光分析。切片用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封装。
To Purchase # 46512S
目录# 规格 价格 库存
46512S
100 µl

支持性数据

反应性 M
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 大鼠 IgG2b、kappa

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

应用 稀释度
免疫荧光法(冰冻) 1:50

保存

保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。该产品在 -20C 下可稳定保存 36 个月。切勿分装抗体。

实验步骤

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免疫荧光法(冰冻)

A. 溶液与试剂

:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。

  1. 20 X 磷酸盐缓冲液 (PBS): (9808) 要制备 1L 1X PBS:添加 50 ml 20X PBS 至 950 ml dH2O 中并混合。调节 pH 至 8.0。
  2. 甲醛:16%,无甲醇,Polysciences 公司生产。(cat# 18814),使用新鲜制剂,小瓶打开后在 4°C 避光保存,同时在 1X PBS 中稀释使用。
  3. 封闭缓冲液:(1X PBS / 5% 常规血清/ 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 0.5 ml 与二抗同一物种来源的正常血清(例如 Normal Goat Serum (#5425) 添加至 9.5 ml 1X PBS)并充分混合。搅拌时加入 30 µl Triton™ X-100。
  4. 抗体稀释缓冲液: (1X PBS / 1% BSA / 0.3% Triton™ X-100):要制备 10 ml,添加 30 µl Triton™ X-100 至 10 ml 1X PBS 中。充分混合后,添加 0.1 g BSA (#9998),并混合。
  5. 建议的荧光染料标记抗大鼠二抗:

  6. Prolong® Gold AntiFade Reagent (#9071),Prolong® Gold AntiFade Reagent with DAPI (#8961)。

B. 样品制备 - 冰冻/恒冷箱切片 (IF-F)

  1. 冰冻固定组织进行免疫染色(C 部分)。
  2. 对新鲜未固定的冰冻组织,请立刻按下列步骤固定:
    1. 切片用 1X PBS 中稀释的 4% 甲醛浸没。

      注意:甲醛有毒性,仅可在通风橱中使用。

    2. 室温下固定切片 15 分钟。
    3. 吸干液体后用 1X PBS 冲洗三次,每次 5 分钟。
    4. 继续进行免疫染色操作(C 部分)。

C. 免疫染色

注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

  1. 在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。
  2. 封闭标本时,按照产品网页实验步骤中推荐的稀释比例,在抗体稀释缓冲液中配制一抗。
  3. 吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。
  4. 4°C 孵育过夜。
  5. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  6. 用抗体稀释缓冲液将荧光物质标记的二抗稀释后,室温下避光孵育标本 1–2 小时。
  7. 用 1X PBS 漂洗三次,每次 5 分钟。
  8. 使用 Prolong® Gold Antifade Reagent (#9071) 或 Prolong® Gold Antifade Reagent with DAPI (#8961) ,用盖玻片盖住切片。
  9. 要达到最佳效果,使用封片液室温过夜。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。

发布​时间 2006 年 11 月

修订时间 2016 年 7 月

实验步骤编号:152

特异性/灵敏度

CD11b/ITGAM (M1/70) 大鼠单克隆抗体可检测内源水平的 CD11b/ITGAM 总蛋白。该抗体可检测细胞外结构域中的表位。

物种反应性:

小鼠

基于 100% 序列同源性预测发生反应的物种:

来源/纯化

通过亲和色谱从组织培养上清液纯化这种单克隆抗体。

背景

分化抗原簇分子 11b (CD11b)/整合素 α m (ITGAM) 是一种跨膜蛋白,可形成由 α 和 β 亚基组成的异二聚体 (1)。CD11b 在骨髓系细胞中表达,通常用作骨髓系细胞的一个标记物,如中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和小胶质细胞 (2)。CD11b 在中性粒细胞中的 Ser1126 位点(细胞浆尾区)被磷酸化。研究表明,这种磷酸化活动对白细胞从血流传输到组织的过程中发挥作用 (3)。此外,全基因组关联研究表明,CD11b 与系统性红斑狼疮 (SLE) 等自身免疫病有关 (4)。

通路

探索与本品相关的通路。

限制使用

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