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95835
CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb
一抗
单克隆抗体

CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb #95835

引用 (0)
筛选器:
  1. IHC
Immunohistochemistry Image 1: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

在 Leica® Bond™ Rx 上使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 2: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人尿路上皮癌细胞进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 3: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

在 Leica® BOND™ Rx 上使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞癌进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 1: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb对未转染(左图)或转染 CD103(右图)的石蜡包埋的 293T 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 2: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 3: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜样腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Immunohistochemistry Image 4: CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb

使用 CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

购买 # 95835S
产品货号 规格 价格 库存
95835S
100 µl

支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 兔 IgG

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

应用 稀释度
IHC-Leica® Bond™ 1:50 - 1:200
免疫组织化学(石蜡) 1:50 - 1:200

保存

保存在含〜1%BSA和少于0.1%叠氮化钠的 Tris 缓冲液中。保存在 4°C 时,可保持稳定 12 个月。不要分装抗体。‭

实验步骤

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免疫组织化学 (Leica® BOND™)

:请参阅产品数据表或产品网页,了解合适的抗体稀释度^。

  步骤 试剂 时间/温度
1 脱蜡 BOND™ Dewax Solution、100% 乙醇、BOND™ Wash Solution 预编程的 Leica® BOND™ 
2 抗原修复  BOND™ Epitope Retrieval ER2 Solution 20 分钟,100˚C | 实验步骤:用 ER2 进行 20 分钟的热诱导表位修复 (HIER)
3 过氧化物封闭液 Refine Detection Kit Peroxide Block* 5 分钟
  洗涤 BOND™ Wash Solution  3x 0:00 分钟
4 蛋白封闭液(可选) #5425 NGS 或 #15019 Animal-Free Blocking Solution   20 分钟 
5 一抗^ 用 #8112 SignalStain® Antibody Diluent 稀释 30 分钟 
  洗涤 BOND™ Wash Solution  3x 2:00 分钟
不适用 Post Primary Mouse Linker Refine Detection Kit Post Primary*  不适用 
6 二次检测 Refine Detection Kit Polymer*  10 分钟 
  洗涤 BOND™ Wash Solution/Deionized Water 定制(参见下文)
7a 可视化 Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*  0:00 分钟 
7b 可视化 Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*  10 分钟 
  洗涤 去离子水 3x 0:00 分钟
8 复染 Refine Detection Kit Hematoxylin*  5 分钟 
  洗涤 去离子水 0:00 分钟 
  洗涤 BOND™ Wash Solution  0:00 分钟 
  洗涤 去离子水 0:00 分钟 
9 脱水(离线):    
  在 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 秒。  
  在 100% 乙醇中重复孵育 2 次,每次 10 秒。  
  在二甲苯中重复孵育 2 次,每次 10 秒。  
10 用盖玻片和 #14177 SignalStain® Mounting Medium 封片。  
       
  可选订制洗涤: BOND™ Wash Solution 2:00
    BOND™ Wash Solution 分液器类型:开放式 0:00
    BOND™ Wash Solution 2:00
    BOND™ Wash Solution 分液器类型:开放式 0:00
    BOND™ Wash Solution 0:00
    去离子水 0:00

*BOND™ Polymer Refine Detection Kit(货号:DS9800)中所含的试剂

LEICA® 是 Leica Microsystems IR GmbH 的注册商标。

BOND™ 是 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 的商标。CST 和 Leica Microsystems IR GmbH 或 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 之间没有附属或赞助关系。

发布​于 2018 年 8 月 

修订于 2018 年 9 月

实验步骤编号:1444

免疫组织化学(石蜡)

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子 (RODI) 水或同等级别的水制备溶液。

  1. 二甲苯。
  2. 无水变性乙醇,组织级(100% 和 95%)。
  3. 去离子水 (dH2O)。
  4. 苏木精(可选)。
  5. 洗涤缓冲液:
    1. 含 Tween® 20的 1X Tris 盐缓冲液 (TBST) :要制备 1L 1X TBST,添加 100 ml 含 Tween® 20 的 10 X Tris 盐缓冲液 (#9997) 至 900 ml dH2O 中并混合。
  6. SignalStain® Antibody Diluent (#8112)。
  7. 1X 柠檬酸盐修复液:要制备 250 mL 的 1X 柠檬酸盐修复液,将 25 ml 的 SignalStain® Citrate Unmasking Solution (10X) (#14746) 稀释到 225 mL 的 dH2O 中。
  8. 3% 过氧化氢:要制备 100 ml,添加 10 ml 30% H2O2 至 90 ml dH2O 中。
  9. 封闭液:TBST/5% Normal Goat Serum 或 1X Animal-Free Blocking Solution。
    1. TBST/5% Normal Goat Serum:要制备 5 ml 1X TBST,添加 250 µl Normal Goat Serum (#5425)。
    2. 1X Animal-Free Blocking Solution:要制备 4 mL of dH2O,添加 1 ml 的 Animal-Free Blocking Solution (5X) (#15019)。
  10. 检测系统:SignalStain® Boost IHC Detection Reagents (HRP, Rabbit #8114)。
  11. 底物:SignalStain® DAB Substrate Kit (#8059)。
  12. 苏木精: Hematoxylin (#14166)。
  13. 封片剂: SignalStain® Mounting Medium (#14177)。

B. 脱蜡/复水

注意:在制作过程中务必随时保持切片处于湿润状态。

  1. 脱蜡/水化合步骤:
    1. 将切片放入二甲苯的洗液中孵育 3 次,每次 5 分钟。
    2. 将切片放入 100% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 分钟。
    3. 将切片放入 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 分钟。
  2. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。

C. 抗原修复

对于柠檬酸盐:将切片浸入 1 X 柠檬酸盐修复液,再放入微波炉中加热直至沸腾;继续保持亚沸腾温度 10 分钟 (95°-98°C)。在实验台上冷却切片 30 分钟。

D. 染色

  1. 用 dH2O 清洗切片三次,每次 5 分钟。
  2. 切片放入 3 % 过氧化氢水溶液中,孵育 10 分钟。
  3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
  4. 用洗涤缓冲液清洗切片持续 5 分钟。
  5. 使用 100–400 µl 封闭液将每张切片在室温下封闭 1 小时。
  6. 去除封闭液,并给每块切片添加 100–400 µl 在 SignalStain® Antibody Diluent (#8112) 中稀释过的一抗。4°C 孵育过夜。
  7. 使 SignalStain® Boost Detection Reagent (HRP, Rabbit #8114) 平衡至室温。
  8. 清除抗体溶液,用洗涤缓冲液清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
  9. 根据需要在切片上滴 1–3 滴 SignalStain® Boost Detection Reagent (HRP, Rabbit #8114)。在加湿箱中室温孵育 30 分钟。
  10. 用洗涤缓冲液清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
  11. 加入 1 滴 (30 µl) SignalStain® DAB Chromogen Concentrate 至 1 ml 的 SignalStain® DAB Diluent 中,使用前充分混合。
  12. 在每张切片上加 100–400 µl SignalStain® DAB,并密切观察,通常 5–10 分钟即可得到合适的染色强度。
  13. 将切片浸入 dH2O 中。
  14. 如果需要,使用 hematoxylin (#14166) 复染切片。
  15. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
  16. 使切片脱水:
    1. 在 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 秒。
    2. 在 100% 乙醇中重复孵育 2 次,每次 10 秒。
    3. 在二甲苯中重复孵育 2 次,每次 10 秒。
  17. 使用盖玻片和封片剂 (#14177) 封片。
检测试剂/底物兼容性
推荐的
检测试剂
SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Rabbit) #8114 SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (AP, Rabbit) #18653
兼容的
色原
SignalStain® DAB Substrate Kit #8059 SignalStain® Vibrant Red Alkaline Phosphatase Substrate Kit #76713
SignalStain® Vivid Purple Peroxidase Substrate Kit #96632  

注意:使用非本实验步骤中指定的检测试剂可能需要进一步优化一抗,以考虑检测试剂的不同灵敏度。

发布​于 2010 年 2 月 

修订于 2020 年 4 月

实验步骤编号:1989

特异性/敏感性

CD103/ITGAE (EP206) Rabbit mAb 可检测 CD103/ITGAE 蛋白的内源水平。通过免疫组织化学分析在肾近端小管中观察到非特异性染色。

物种反应性:

来源/纯化

使用与人 CD103/ITGAE 蛋白的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

分化群分子 103 (CD103)/整合素、α E (ITGAE) 是一种跨膜蛋白,可形成由 α 和 β 亚基组成的异二聚体。CD103/ITGAE 由粘膜组织(1,2)中的 CD4 +和 CD8 + T 细胞、树突状细胞和肥大细胞的子集表达。由 CD103/ITGAE 和整合素 β 7组成的异二聚体与上皮细胞上发现的细胞黏附分子 E-cadherin 相互作用。CD103/ITGAE 和整合素 β 7复合体在胸腺细胞增殖、肠道 T 细胞归位和抗肿瘤免疫应答中发挥作用(3-5)。研究表明,CD103/ITGAE(+) 免疫细胞的存在可用作不同上皮癌的有利预后的标记(6,7)。

  1. Takada, Y. et al. (2007) Genome Biol 8, 215.
  2. Andrew, D.P. et al. (1996) Eur J Immunol 26, 897-905.
  3. Kutlesa, S. et al. (2002) J Cell Sci 115, 4505-15.
  4. Le Floc'h, A. et al. (2007) J Exp Med 204, 559-70.
  5. Strauch, U.G. et al. (2001) J Immunol 166, 3506-14.
  6. Kim, Y. et al. (2019) Sci Rep 9, 3808.
  7. Webb, J.R. et al. (2014) Clin Cancer Res 20, 434-44.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

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