反应性 | H M |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 130, 260 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫沉淀 | 1:50 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
本实验步骤适用于使用 Protein A agarose beads 对天然蛋白进行免疫沉淀,以进行蛋白质免疫印迹或激酶活性分析。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
10X 细胞裂解缓冲液:(#9803) 要制备 10 ml 的 1X 细胞裂解缓冲液,将 1 ml 细胞裂解缓冲液添加至 9 ml dH2O,并混合。
注意:使用前,请立即添加 1 mM PMSF (#8553)。
继续下述其中一项的具体步骤。
注意:为了最大限度减少变性 IgG 重链产生的遮盖作用 (~50 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb (#3677) 或 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)。为了最大限度减少变性 IgG 轻链产生的遮盖作用 (~25 kDa),我们建议使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (#3678)(或 HRP conjugate #5127)
发布于 2008 年 12 月
修订于 2018 年 4 月
实验步骤编号:409
CaSR (D6D9V) Rabbit mAb 可识别 CaSR 总蛋白的内源水平。
人, 小鼠
使用与人类 CaSR 蛋白 Pro368 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CaSR 作为细胞外钙离子传感受体,是一种参与钙离子内稳态的广泛表达的 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 。CaSR 在甲状旁腺和肾脏中作为感受器,并且已证实 CaSR 活性改变可导致人类甲状腺疾病 (1)。细胞外钙或其他配体作用下此受体激活时,可导致磷脂酶 C (PLC) 激活,释放 IP3和胞内储存的钙 (2)。在人类甲状腺和肾脏细胞中,促炎症细胞因子 IL-1β 和 TNF-α 通过激活 NF-κB 通路,增加 CaSR 的基因表达,而此通路可能涉及重症患者中常见的低钙血症 (3)。钙离子浓度升高和 CaSR 表达上升与骨转移性前列腺癌细胞系的增殖和转移相关 (4)。在小肠上皮细胞中,CaSR 参与环核苷酸代谢和液体分泌的调节,而液体分泌可在肠道病原体刺激下,导致危及生命的体液流失 (5)。CaSR 与细丝蛋白(一种肌动蛋白结合蛋白)的相互作用,可支撑聚集到细胞骨架上的信号转导通路的组织构成,其中包括 CaSR 介导的 MAPK 通路激活 (6)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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