反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 12,14,48 |
来源/同种型 | 小鼠 IgG1 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:19
人
使用与人类 caspase-2 蛋白羧基末端部分相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Caspase-2(Nedd2/ICH-1)是具有长前导肽序列的 I 类 caspase,这对于核定位是非常必要的。细胞凋亡通路被激活后,procaspase 在 Asp316 位点处被剪切,从而产生一个 14 kDa 的片段和一个 32 kDa 的前导肽序列(大亚基)。随后在 Asp152 和 Asp330 位点被剪切,产生 18 kDa 的大亚基和 12 kDa 的小片段(1)。Caspase-2 是对细胞基因毒性应激或有丝分裂障碍的一种核凋亡反应。在募集到含 p53 诱导的死亡结构域蛋白 PIDD 的复合体时发生激活 (2)。表明 caspase-2 可以是一个核起始 caspase,对于激活下游凋亡事件中的 caspase-9 和 caspase-3 是必要的 (3, 4)。在由紫外线诱导的 DNA 损伤引起的凋亡通路中,caspase-2 的加工发生在线粒体功能障碍下游以及 caspase-9 和 caspase-3 激活的下游,拓展了 caspase-2 作为一个平行效应子 caspase 可能发挥的作用 (5)。
探索与本品相关的通路。
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