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10612
Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
一抗
单克隆抗体

Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free) #10612

引用 (0)
筛选器:
  1. WB
  2. IHC
  3. IF
  4. F
Western Blotting Image 1: Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
使用 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb 对转染空载 (-) 或转染表达从 酿脓链球菌中分离出来的 Cas9 蛋白 (spCas9) (+) 或重组核酸酶缺失型 Cas9 (dCas9) 蛋白或重组 Cas9 切割酶 (niCas9) 蛋白表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
Western Blotting Image 2: Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
使用 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb(上)和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb #4970(下),对转染空载 (-) 或经构建表达 Cas9 (+) 转染的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
Immunohistochemistry Image 1: Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
使用 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb ,对在 Nprl2-缺陷型 293 细胞沉淀物(左,阳性)和未处理的 293 细胞沉淀物(右,阴性)中 Cas9 表达进行免疫组织化学分析。在 Nprl2 缺陷细胞中,通过瞬时转染 Cas9 和 Nprl2 特异性指导序列敲除 Nprl2 表达。293/Nprl2 -/-细胞由马萨诸赛州剑桥市麻省理工学院的 Rachel Wolfson、Lynne Chantranupong 和 David Sabatini 惠赠。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
Immunofluorescence Image 1: Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
使用 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb(绿色),对在 Nprl2-缺陷型细胞(左)和未处理 293 细胞(右)中的 Cas9 表达进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。293/Nprl2 -/-细胞由马萨诸赛州剑桥市麻省理工学院的 Rachel Wolfson、Lynne Chantranupong 和 David Sabatini 惠赠。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
Flow Cytometry Image 1: Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free)
使用 Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb  对未经处理的(蓝色)或转染 NPRL2 敲除 (-/-) 质粒(绿色)的 HEK-293 细胞进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。数据的生成使用的是该产品的常规组分产品。
To Purchase # 10612SF
目录# 规格 价格 库存
10612SF
100 µg

支持性数据

反应性 所有物种
灵敏度 转染性
MW (kDa) 160
来源/同种型 小鼠 IgG1

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

本产品是产品 #14697 的无载体版本。所有数据均使用相同的克隆抗体,是包含 BSA 和甘油的常规组分产品。

该制剂非常适用于需要专门或定制抗体标记的技术,包括荧光团、金属、镧系元素和寡核苷酸。不推荐用于 ChIP、ChIP-seq、CUT&RUN 或 CUT&Tag 检测。如果您需要用于染色质分析的无载体配方,请联系我们。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

剂型

以 1X PBS、无BSA 和叠氮化物形式提供。

本品的常规组分产品为 #14697

保存

-20℃ 保存。此产品将在 -20°C 下冷冻,因此建议分装到一次性小瓶中,以避免多次冷冻/解冻循环。可能存在轻微沉淀,轻轻涡旋可溶解。这不会干扰抗体性能。

特异性/灵敏度

Cas9 (7A9-2A3) Mouse mAb (BSA and Azide Free) 可检测 Cas9 总蛋白的转染水平。

物种反应性:

预期的所有物种

来源/纯化

通过采用对化脓性链球菌 Cas9 的氨基端特异的重组蛋白,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 是一种 RNA 引导的 DNA 核酸酶,并且是 化脓性链球菌 CRISPR 抗病毒免疫系统的组成部分,该系统提供针对外部染色体遗传物质的适应性免疫 (1)。CRISPR 抗病毒作用机制涉及三个步骤:(i) 通过宿主细菌取得外来 DNA;(ii) CRISPR RNA (crRNA) 的合成和成熟,随后形成 RNA-Cas 核酸酶蛋白质复合体;和 (iii) 通过该复合体识别外来 DNA 以及由 Cas 核酸酶活性的剪切作用进行定向干扰 (2)。II 型 CRISPR/Cas 抗病毒免疫系统可提供强有力的基因组精确编辑工具,并且具有特异性调节基因和治疗性应用的潜力 (3)。在细胞中必须引入或表达 Cas9 蛋白和引导 RNA(包含 crRNA 和反式激活 crRNA (tracrRNA) 之间的融合)。引导 RNA 5' 末端的一个 20 核苷酸序列,可以把 Cas9 引导至特定的 DNA 靶标位点。因此,可“编程” Cas9 以便在体外及在细胞和生物中切割多种 DNA 位点。CRISPR/Cas9 基因组编辑工具已经用于许多生物体中,包括小鼠和人类细胞 (4,5)。研究显示,CRISPR 可以用来在啮齿类和灵长类胚胎干细胞中产生突变等位基因或报告基因 (6-8)。
  1. Horvath, P. and Barrangou, R. (2010) Science 327, 167-70.
  2. Wiedenheft, B. et al. (2012) Nature 482, 331-8.
  3. Singh, P. et al. (2015) Genetics 199, 1-15.
  4. Cong, L. et al. (2013) Science 339, 819-23.
  5. Mali, P. et al. (2013) Science 339, 823-6.
  6. Li, D. et al. (2013) Nat Biotechnol 31, 681-3.
  7. Shen, B. et al. (2013) Cell Res 23, 720-3.
  8. Niu, Y. et al. (2014) Cell 156, 836-43.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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