反应性 | H M R Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 47 |
来源/同种型 | 小鼠 IgG1 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫荧光法(免疫细胞化学) | 1:50 |
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:19
若想获得高质量的免疫荧光图片,请使用我们 #12727 Immunofluorescence Application Solutions Kit 中高效且划算的预制试剂。
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
建议使用荧光物质标记的 Anti-Mouse 二抗:
注意:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。
吸干液体,随后在细胞上覆盖一层 2–3 mm 用 1X PBS 稀释的 4% 甲醛。
注意:甲醛有毒性,需在通风橱中使用。
注意:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另有注明需要在避光湿盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。
发布时间 2006 年 11 月
修订时间 2013 年 11 月
实验步骤编号:148
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用人网腔钙结合蛋白羧基末端特异性重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
网腔钙结合蛋白属于 CREC 蛋白家族,该家族还包含网钙蛋白、ERC-55/TCBP-49/E6BP、Cab45 和 crocalbin/CBP-50。这些 EF-手形蛋白位于内质网 (ER) 内,并且参与哺乳动物细胞的分泌通路 (1)。网腔钙结合蛋白有两种同工型,对应于 CALU 基因的选择性剪接变体 (2)。研究表明,网腔钙结合蛋白通过羧基末端 HDEF 内质网滞留信号定位在内质网上 (3),并通过分泌通路转运后进行分泌 (4)。分泌的网腔钙结合蛋白通过与血清淀粉样蛋白 P 组分相互作用,在淀粉样变性中起作用 (5)。网腔钙结合蛋白也是囊性纤维化跨膜转导调节分子 (CFTR) 突变体的一个分子伴侣 (6)。研究人员对子宫内膜癌进行了蛋白质组学分析,发现网腔钙结合蛋白是子宫内膜癌的一个潜在靶标 (7)。
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