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95102
Calretinin (CAL6) Mouse mAb
一抗
单克隆抗体

Calretinin (CAL6) Mouse mAb #95102

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筛选器:
  1. IHC
Immunohistochemistry Image 1: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人卵巢颗粒细胞瘤进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 2: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜腺癌进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 3: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 4: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人胃腺癌进行免疫组织化学分析。注意到有脂肪细胞的染色。
Immunohistochemistry Image 5: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人结肠进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 6: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人脑进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 7: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人肺脏进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 8: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人胰腺进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 9: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的正常人小肠进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 10: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
以浓度匹配的 Mouse (E5Y6Q) mAb IgG2a Isotype Control #61656(右图)作为对照,使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb(左图)对石蜡包埋的人阑尾进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 11: Calretinin (CAL6) Mouse mAb
使用 Calretinin (CAL6) Mouse mAb 对石蜡包埋的 MKN-45 细胞沉淀物(左图,阳性)或 PANC-1 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
To Purchase # 95102S
目录# 规格 价格 库存
95102S
100 µl

支持性数据

反应性 H
灵敏度 内源性
MW (kDa)
来源/同种型 小鼠 IgG2a

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

应用 稀释度
免疫组织化学(石蜡) 1:50

保存

以液体组织培养上清液形式保存,含有叠氮化钠作为防腐剂。保存在 4°C 时,可保持稳定 6 个月。切勿分装抗体。‭

实验步骤

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免疫组织化学(石蜡)

A. 溶液与试剂

注意:使用反渗透去离子 (RODI) 水或同等级别的水制备溶液。

  1. 二甲苯。
  2. 无水变性乙醇,组织级(100% 和 95%)。
  3. 去离子水 (dH2O)。
  4. 苏木精(可选)。
  5. 洗涤缓冲液:
    1. 含 Tween®20 (TBST) 的 1X Tris 盐缓冲液 (TBST) :要制备 1L 1X TBST,添加 100 ml 含 Tween® 20 的 10 X Tris 盐缓冲液 (#9997) 至 900 ml dH2O 中并混合。
  6. SignalStain® Antibody Diluent (#8112)。
  7. 1X EDTA 修复液:要制备250 mL 的 1X EDTA 修复液,使用 225 mL 的 dH2O 稀释25 ml 的 SignalStain® EDTA Unmasking Solution (10X) (#14747)。
  8. 3% 过氧化氢:要制备 100 ml,添加 10 ml 30% H2O2 至 90 ml dH2O 中。
  9. 封闭液:TBST/5% Normal Goat Serum 或 1X Animal-Free Blocking Solution。
    1. TBST/5% Normal Goat Serum:要制备 5 ml 1X TBST,添加 250 µl Normal Goat Serum (#5425)。
    2. 1X Animal-Free Blocking Solution:要制备4 mL 的 dH2O,添加 1 ml 的 Animal-Free Blocking Solution (5X) (#15019)。
  10. 检测系统:SignalStain® Boost IHC Detection Reagents (HRP, Mouse #8125)。
  11. 底物:SignalStain® DAB Substrate Kit (#8059)。
  12. 苏木精: Hematoxylin (#14166)。
  13. 封片剂: SignalStain® Mounting Medium (#14177)。

B. 脱蜡/复水

注意:在制作过程中务必随时保持切片处于湿润状态。

  1. 脱蜡/水化合步骤:
    1. 将切片放入二甲苯的洗液中孵育 3 次,每次 5 分钟。
    2. 将切片放入 100% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 分钟。
    3. 将切片放入 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 分钟。
  2. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。

C. 抗原修复

对于 EDTA:将切片浸入 1X EDTA 修复液中,再放入微波炉中加热直到沸腾;继续保持 15分钟的亚沸腾温度 (95°-98°C)。无需冷却。

D. 染色

  1. 用 dH2O 清洗切片三次,每次 5 分钟。
  2. 切片放入 3 % 过氧化氢水溶液中,孵育 10 分钟。
  3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
  4. 用洗涤缓冲液清洗切片持续 5 分钟。
  5. 使用 100–400 µl 封闭液将每张切片在室温下封闭 1 小时。
  6. 去除封闭液,并给每块切片添加 100–400 µl 在 SignalStain® Antibody Diluent (#8112) 中稀释过的一抗。4°C 孵育过夜。
  7. 让 SignalStain® Boost Detection Reagent (HRP, Mouse #8125) 平衡至室温。
  8. 清除抗体溶液,用洗涤缓冲液清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
  9. 按需在切片上滴 1–3 滴 SignalStain® Boost Detection Reagent (HRP, Mouse #8125)。在加湿箱中室温孵育 30 分钟。
  10. 用洗涤缓冲液清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
  11. 加入 1 滴 (30 µl) SignalStain® DAB Chromogen Concentrate 至 1 ml 的 SignalStain® DAB Diluent 中,使用前充分混合。
  12. 在每张切片上加 100–400 µl SignalStain® DAB,并密切观察,通常 5–10 分钟即可得到合适的染色强度。
  13. 将切片浸入 dH2O 中。
  14. 如果需要,使用 hematoxylin (#14166) 复染切片。
  15. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
  16. 使切片脱水:
    1. 在 95% 乙醇中孵育切片 2 次,每次 10 秒。
    2. 在 100% 乙醇中重复孵育 2 次,每次 10 秒。
    3. 在二甲苯中重复孵育 2 次,每次 10 秒。
  17. 使用盖玻片和封片剂 (#14177) 封片。
检测试剂/底物兼容性
推荐的
检测试剂
SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Mouse) #8125 SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (AP, Mouse) #31926
兼容的
色原
SignalStain® DAB Substrate Kit #8059 SignalStain® Vibrant Red Alkaline Phosphatase Substrate Kit #76713
SignalStain® Vivid Purple Peroxidase Substrate Kit #96632  

注意:使用非本实验步骤中指定的检测试剂可能需要进一步优化一抗,以考虑检测试剂的不同灵敏度。

发布​时间 2015 年 2 月

修订时间 2020 年 4 月

实验步骤编号:1990

特异性/灵敏度

Calretinin (CAL6) Mouse mAb 可识别 Calretinin 蛋白的内源水平。

物种反应性:

来源/纯化

使用与全长人 Calretinin 蛋白相对应的原核重组蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

钙网膜蛋白(29 kDa 钙结合蛋白、钙结合蛋白 2)是 CALB2 基因编码的 EF 手形家族的一种钙结合蛋白。它在视网膜、听觉系统和小脑颗粒细胞的不同神经元细胞群中的表达不同于同源家族成员钙结合蛋白-d28k (1,2),并且是丘脑下核及黑质特异性神经元细胞亚群的一个标记物 (3)。钙网膜蛋白已表明在调节神经元兴奋性和诱导长期增强作用方面起着重要作用 (1)。研究表明,从病理上来说,钙网膜蛋白是上皮间皮瘤的一种选择性标记物,这使它成为区别腺癌的诊断工具 (4)。
  1. Camp, A.J. and Wijesinghe, R. (2009) Int J Biochem Cell Biol 41, 2118-21.
  2. Rogers, J.H. (1987) J Cell Biol 105, 1343-53.
  3. Fortin, M. and Parent, A. (1996) Brain Res 708, 201-4.
  4. Gotzos, V. et al. (1996) Pathol Res Pract 192, 137-47.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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