反应性 | H M |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 35 至 38 小鼠 LAP。45 至 49 人 LAP。 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 小鼠
大鼠
使用与人 C/EBP β 氨基末端序列相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
CCAAT/增强子结合蛋白 (C/EBP) 是一个转录因子家族,对细胞分化、晚期功能和炎症反应十分关键 (1)。目前已确定该家族有 6 个成员 (C/EBPα, β, γ, δ, ε, ζ),它们分布在不同组织中 (1)。C/EBPβ 有两种形式,即 38 kDa 的肝激活蛋白 (LAP) 和 20 kDa 的肝抑制蛋白 (LIP),它们可能是选择性翻译的产物。38 kDa LAP 蛋白是一种转录激活剂,而 LIP 则是 C/EBPβ 转录活性的抑制剂 (2)。C/EBPβ 在不同位点的磷酸化会刺激其转录活性 (3-5)。大鼠 C/EBPβ 在 Serine 105 位点(一个仅存在于大鼠序列的独特位点)的磷酸化对大鼠 C/EBPβ 的激活至关重要 (6)。
探索与本品相关的通路。
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