反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 130 |
来源/同种型 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 Bub1b Lys370 周围氨基酸序列相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
包含 Bub1、Bub1b、Bub3、Mad2 和 Cdc20 在内的有丝分裂检查点复合体 (MCC) 可控制染色体分离以及监控丝粒与微管的相互作用 (1)。在有丝分裂期间,MCC 复合体会抑制 Anaphase Promoting Complex/Cyclosome (APC/C) 的泛素连接酶活性,从而防止带有不对齐的染色体的细胞过早地进入细胞分裂后期 (2)。研究表明,Bub1b 和 Bub1 激酶可在不同人种恶性肿瘤中发生突变,包括造血癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌 (3)。在斑花叶非整倍体综合症和过早染色单体分离综合征中均发现 Bub1b 中的双等位基因突变 (4)。Bub1b 小鼠种系敲除是杂合动物的胚胎致死,且其带有显示遗传不稳定性、过早衰老表型和逐渐增加的肿瘤易感性 (5)。Bub3 与 Bub1 和 Bub1b 两者相结合,促进它们向着丝粒募集 (6),并且在微管和着丝粒功能性相互作用中也需要Bub3 (7)。
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