反应性 | H M R Mk |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 220 |
来源/亚型 | 小鼠 IgG1 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
免疫组织化学(石蜡) | 1:800 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
注意:在制作过程中务必随时保持切片处于湿润状态。
对于柠檬酸盐:将切片浸入 1 X 柠檬酸盐修复液,再放入微波炉中加热直至沸腾;继续保持亚沸腾温度 10 分钟 (95°-98°C)。在实验台上冷却切片 30 分钟。
推荐的 检测试剂 |
SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (HRP, Mouse) #8125 | SignalStain® Boost IHC Detection Reagent (AP, Mouse) #31926 |
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兼容的 色原 |
SignalStain® DAB Substrate Kit #8059 | SignalStain® Vibrant Red Alkaline Phosphatase Substrate Kit #76713 |
SignalStain® Vivid Purple Peroxidase Substrate Kit #96632 |
注意:使用本实验步骤中未指定的检测试剂可能需要进一步优化一抗,考虑到检测试剂的不同灵敏度。
发布于 2010 年 2 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:280
Brg1 (E8V5B) Mouse mAb 可识别内源水平的Brg1总蛋白。这种抗体不会与 BRM 蛋白发生交叉反应。
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用与人 Brg1 蛋白中 Pro57 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
调节染色质结构是调控转录激活和抑制的必要部分。可以通过至少两个进化上保守的策略,即通过 ATP-依赖性染色质重塑蛋白破坏组蛋白-DNA 接触或通过组蛋白尾修饰(包括甲基化和乙酰化),来进行修饰。四类 ATP-依赖性组蛋白重塑蛋白之一为 SWI/SNF 复合体,其核心催化亚基是 Brg1 或高度相关的蛋白质 hBRM (1)。这种 SWI/SNF 复合体含有不同的亚基,但其与 Brg1 或 hBRM 的结合是恒定的 (1)。据已表明,SWI/SNF 复合体可调控基因激活、细胞生长、细胞周期和分化 (1)。据已表明,Brg1/hBRM 可通过增强糖皮质激素受体的转录激活来调控转录 (2)。尽管通常与转录激活相关,但还发现 Brg1/hBRM 存在于与转录抑制相关的复合体中,包括 HDACs、Rb 和 Tif1β (3-5)。Brg1/hBRM 在哺乳动物早期胚胎发生期间对调控基因转录起着至关重要的作用。此外,Brg1/hBRM 还作为抑癌基因起到作用,并且 Brg1 会在多种肿瘤细胞系中发生突变 (6-8)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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