反应性 | H |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 22 |
来源/亚型 | 兔 IgG |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的叠氮化钠中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Bok (D7V2N) Rabbit mAb 可识别 Bok 总蛋白的内源水平。
人
使用与人 Bok 蛋白的 Val88 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
Bcl-2 家族由进化上保守的多种蛋白质组成,这些蛋白质含有通过控制线粒体膜通透性和细胞色素 C 释放调节凋亡的 Bcl-2 同源结构域 (BH) (1-3)。已经鉴定到介导蛋白质相互作用的四种 BH 结构域 (BH1-4)。基于功能和序列同源性,该家族可以划分成三组:促存活成员包括 Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1、A1 和 Bcl-w;促凋亡蛋白包括 Bax、Bak 和 Bok,并且“仅含 BH3”蛋白包括 Bad、Bik、Bid、Puma、Bim、Bmf、Noxa 和 Hrk。促进死亡的和抑制死亡的 Bcl-2 家族成员之间的相互作用导致其中促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白的比率控制细胞转归的变阻器模型 (4)。因此,促存活成员通过结合于并拮抗促死亡成员而执行其行为。通常,“仅含 BH3 成员”可以结合于并拮抗促存活蛋白,导致凋亡增加 (5)。尽管这个系统或许存在一些冗余性,但这些家族成员中许多成员的组织特异性、转录调节作用和翻译后调节作用可以解释不同的生理学作用。
如同其他家族成员,Bok 基于序列同源性和与选择的抗凋亡家族成员相互作用而鉴定 (6,7)。尽管最初描述 Bok 在生殖组织如卵巢、睾丸和子宫中优势表达 (6),但后续研究已经发现 Bok 在多种成体组织和发育组织中选择性表达 (7)。Bok 基因在人肿瘤中频繁地突变,表明抑癌基因活性 (8)。尽管 Bok 在结构上类似于促凋亡蛋白 Bax 和 Bak,但它似乎在功能上不同。小鼠中 Bok 丧失没有明显的效应表型 (9)。但是,附加研究已经证实 Bok 在对内质网应激作出反应的凋亡中发挥不同作用 (10,11)。Bok 的稳定性受内质网相关降解 (ERAD) 通路调节 (11)。Bok 表达由蛋白酶体抑制剂引起并触发由这些物质所致的凋亡 (11)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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