使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红/炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇 (10 nM) 处理 45 分钟的 MCF7 细胞的交联染色质与 ARID1B/BAF250B (E9J4T) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 ARID1B 的已知靶基因 TFF1/pS2 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。如需了解其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。本图显示整个 ENSA 基因范围的结合作用。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM, 45 分钟)处理的MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729后,进行交联染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
结肠:
使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
使用 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照的 HeLa 细胞(泳道 1)或 BRM 编码基因出现靶向突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变型 HeLa 细胞的 BRM 分子量变化证实了抗体对 BRM 的特异性。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb, SMARCB1/BAF47 (D8M1X) Rabbit mAb #91735 或 SS18 (D6I4Z) Rabbit mAb #21792 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。SMARCC1/BAF155、SMARCB1/BAF47 和 SS18 均为 SWI/SNF 复合体的所有亚基。结果图显示了 pS2/TFF1 内结合,pS2/TFF1 是一种已知的 SWI/SNF 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。图形显示在 Sox2 内结合,Sox2 是一种已知的 SMARCC1 靶标基因(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他图形)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 ESR1 内结合,ESR1 是一种已知的 SMARCC2/BAF170 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞的交联染色质与 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702、SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对小鼠结肠进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红/炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇 (10 nM) 处理 45 分钟的 MCF7 细胞的交联染色质与 ARID1B/BAF250B (E9J4T) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 21(上图)内的结合,包括 ARID1B 的已知靶基因 TFF1/pS2 (下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 ESR1(上图)内的结合,包括 Brg1 的已知靶基因 (参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)和 ENSA 基因。
使用 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)对 HeLa(阳性,左)细胞和 NCC(阴性,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
前列腺:
使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的人前列腺进行免疫组织化学分析。
使用 BRM (D9E8B) XP® 兔单抗(上)或 Brg1 (A52) Antibody #3508(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb, SMARCB1/BAF47 (D8M1X) Rabbit mAb #91735 或 SS18 (D6I4Z) Rabbit mAb #21792 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。SMARCC1/BAF155、SMARCB1/BAF47 和 SS18 均为 SWI/SNF 复合体的所有亚基。结果图显示在染色体21(上图)内的结合,包括 SWI/SNF 复合体的已知靶标基因 pS2/TFF1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 3(上图)内的结合,包括 SMARCC1 的已知靶标基因 Sox2(下图)(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体6(上图)内的结合,包括 SMARCC2/BAF170 的已知靶标基因 ESR1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
对 MCF7 细胞提取物的 SMARCE1/BAF57 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb。使用 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物、COS-7(左)或 T-47D(右)进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (磁珠法) #9005 对在无酚红/活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇 (10 nM) 处理 45 分钟的 MCF7 细胞的交联染色质与 ARID1B/BAF250B (E9J4T) 兔单克隆抗体 或 正常兔 IgG #2729c 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702、SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的 HeLa(左)细胞沉淀物和 NCC(右)细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。
使用 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。BT-549 是一种缺乏 SMARCE1/BAF57 表达的乳腺导管癌细胞系。
在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺鳞癌进行免疫组织化学分析。
使用 ARID1B/BAF250B (E9J4T) Rabbit mAb(上图)和 α-Actinin (D6F6) Rabbit mAb #6487(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。MIA PaCa-2 细胞不表达 ARID1B/BAF250B 蛋白。
对来自 NCCIT 细胞提取物的 Brg1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 是 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb。使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 BRM (D9E8B) XP (R) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢透明细胞腺癌进行免疫组织化学分析。
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb (泳道 3),对 PANC-1 细胞提取物 SMARCC2/BAF170 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb(上)或 ß-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对 T-47D 和 Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。135kDa-250kDa 之间的某些细胞提取物中可能检测到其他 ARID1A/BAF250A 降解产物,而在 ARID1A/BAF250A 阴性 T-47D 细胞系中缺失这些降解产物。
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb(上)或 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb (泳道 3),对 HeLa 细胞提取物 SMARCC1/BAF155 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
使用 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。