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58214
BAF Complex Antibody Sampler Kit II
一抗
抗体小包装组合

BAF Complex Antibody Sampler Kit II #58214

引用 (0)
BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 1

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。本图显示整个 ENSA 基因范围的结合作用。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 2

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM, 45 分钟)处理的MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729后,进行交联染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 3

结肠:

使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 4

使用 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照的 HeLa 细胞(泳道 1)或 BRM 编码基因出现靶向突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变型 HeLa 细胞的 BRM 分子量变化证实了抗体对 BRM 的特异性。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 5

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb, SMARCB1/BAF47 (D8M1X) Rabbit mAb #91735 或 SS18 (D6I4Z) Rabbit mAb #21792 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。SMARCC1/BAF155、SMARCB1/BAF47 和 SS18 均为 SWI/SNF 复合体的所有亚基。结果图显示了 pS2/TFF1 内结合,pS2/TFF1 是一种已知的 SWI/SNF 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 6

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。图形显示在 Sox2 内结合,Sox2 是一种已知的 SMARCC1 靶标基因(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他图形)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 7

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 ESR1 内结合,ESR1 是一种已知的 SMARCC2/BAF170 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 8

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞的交联染色质与 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702、SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 10

使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对小鼠结肠进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 11

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质,在加入 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 12

使用 ARID1B/BAF250B (E9J4T) Rabbit mAb(上图)和 α-Actinin (D6F6) Rabbit mAb #6487(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。MIA PaCa-2 细胞不表达 ARID1B/BAF250B 蛋白。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 13

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (磁珠法) #9005 对在无酚红/活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,随后用 β-雌二醇 (10 nM) 处理 45 分钟的 MCF7 细胞的交联染色质与 ARID1B/BAF250B (E9J4T) 兔单克隆抗体 或 正常兔 IgG #2729c 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702、SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 14

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 ESR1(上图)内的结合,包括 Brg1 的已知靶基因 (参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)和 ENSA 基因。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 15

使用 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)对 HeLa(阳性,左)细胞和 NCC(阴性,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 16

前列腺:

使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的人前列腺进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 17

使用 BRM (D9E8B) XP® 兔单抗(上)或 Brg1 (A52) Antibody #3508(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 18

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb, SMARCB1/BAF47 (D8M1X) Rabbit mAb #91735 或 SS18 (D6I4Z) Rabbit mAb #21792 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。SMARCC1/BAF155、SMARCB1/BAF47 和 SS18 均为 SWI/SNF 复合体的所有亚基。结果图显示在染色体21(上图)内的结合,包括 SWI/SNF 复合体的已知靶标基因 pS2/TFF1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 19

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 3(上图)内的结合,包括 SMARCC1 的已知靶标基因 Sox2(下图)(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 20

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体6(上图)内的结合,包括 SMARCC2/BAF170 的已知靶标基因 ESR1(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 21

对 MCF7 细胞提取物的 SMARCE1/BAF57 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb。使用 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 22

使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物、COS-7(左)或 T-47D(右)进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 23

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 24

使用 BRM (D9E8B) XP (R) 兔单抗对石蜡包埋的 HeLa(左)细胞沉淀物和 NCC(右)细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 25

使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 26

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,NCCIT 细胞和 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 27

使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红的培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 4 天,然后使用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。每份样品的免疫沉淀 DNA 含量,用染色质投入总量(相当于 1)相对应的信号进行表示。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 28

使用 SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。BT-549 是一种缺乏 SMARCE1/BAF57 表达的乳腺导管癌细胞系。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 29

在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺鳞癌进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 30

对来自 NCCIT 细胞提取物的 Brg1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 是 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb。使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 31

使用 BRM (D9E8B) XP (R) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢透明细胞腺癌进行免疫组织化学分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 32

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb (泳道 3),对 PANC-1 细胞提取物 SMARCC2/BAF170 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 33

使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 34

使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 35

使用 SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 36

使用 ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb(上)或 ß-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对 T-47D 和 Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。135kDa-250kDa 之间的某些细胞提取物中可能检测到其他 ARID1A/BAF250A 降解产物,而在 ARID1A/BAF250A 阴性 T-47D 细胞系中缺失这些降解产物。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 37

使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb(上)或 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 38

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb (泳道 3),对 HeLa 细胞提取物 SMARCC1/BAF155 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

BAF Complex Antibody Sampler Kit II: 图像 39

使用 SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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ARID1A/BAF250A (D2A8U) Rabbit mAb 12354 20 µl
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  • ChIP
H M R Mk 270 兔 IgG
ARID1B/BAF250B (E9J4T) Rabbit mAb 92964 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M 250, 280 兔 IgG
Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 49360 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R Mk 220 兔 IgG
BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb 11966 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • ChIP
H Mk 200 兔 IgG
SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb 11956 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
  • C&R
H M R Mk 155 兔 IgG
SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAb 12760 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R Mk 162, 170 兔 IgG
SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb 33360 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
H M R Mk 57 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

产品说明

BAF 混合型小包装抗体组合套装 II 提供一种经济合算的方法来检测多种 BAF 复合体组分的水平。该试剂盒包含的一抗足以进行至少两次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

BAF 混合型小包装抗体组合套装 II 中的每种抗体均可检测各自特定靶标的内源水平。

来源/纯化

使用与人源 ARID1A/BAF250A 蛋白中 Gly1293、人源 ARID1B/BAF250B 蛋白中 Ala1320 周围的残基、人源 Brg1 蛋白中氨基末端周围的残基、人源 BRM 蛋白的 Gly264、人源 SMARCC1/BAF155 蛋白的 Gly975、人源 SMARCC2/BAF170 的 Ile818 和人源 SMARCE1/BAF57 蛋白的 Leu34 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

ATP 依赖性染色质重构复合体在调控各种胞核的过程中(例如:基因表达、DNA 复制和修复的过程中)起着重要作用 (1,2)。SWI/SNF 染色质重构复合体由 10 个以上的亚基和一个单分子的 ATP 酶催化性亚基 BRM 或 BRG1(仅两者之一)组成。这两种亚基的活性可促进组蛋白-DNA 接触的瓦解,组蛋白-DNA 接触能够导致染色质内部关键调控元件的可接近性发生改变 (2-5)。含有 SWI/SNF 复合体的 BRM/BRG1 被转录因子如核受体、p53、RB 和 BRCA1 召集至靶启动子以调控基因激活、细胞生长、细胞周期和分化 (1,6-9)。BRM 和 BRG1 也被认为是抑癌基因,在几种癌症细胞中,两者的表达水平严重降低 (10-13)。SMARCC1/BAF155、SMARCC2/BAF170 和 SMARCB1/BAF47 是 SWI/SNF 复合体的核心亚基成员,BRG1 在体外进行有效的核小体重构需要 SWI/SNF 复合体 (14)。ARID1A/BAF250A 和 ARID1B/BAF250B 是该复合体中结合 DNA 的成员。它们高度同源、互相排斥,其中 ARID1B/BAF250B 是 ARID1A/BAF250A 突变癌症的一个关键诱发点 (15-17)。SMARCC1、SMARCB1 和 ARID1A 是小鼠胚胎干细胞特异性 SWI/SNF 复合体 (esBAF) 的一个基本部分。SMARCC1 是早期胚胎形成所必需的,尤其是正常的脑和内脏内胚层发育 (18-20)。早期胚胎形成和肝细胞分化也需要 SMARCB1 (21,22)。ARID1A 对胚胎干 (ES) 细胞多能性,以及分化成中胚层源性心肌细胞和脂肪细胞都非常重要 (15)。虽然 SMARCC2 经证实是非多能性细胞中 SWI/SNF 复合体的一部分,但在多能性胚胎干细胞中缺失。在使用视黄酸分化小鼠 ES 细胞时,已证明神经元/神经元祖细胞中的 SMARCC2 表达上调,并且 SMARCC2 的外源性表达会导致干细胞全能性丢失和自我更新 (23)。

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通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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